Đồng nghĩa từTế bào trình tự hóa tử vong( tế bào trình tự hóa tử vong ) nhất bàn chỉ tế bào điêu vong
Tế bào điêu vong ( apoptosis ) chỉ vi duy trìNội hoàn cảnhỔn định, doCơ nhânKhống chế đích tế bào tự chủ đích hữu tự đích tử vong. Tế bào điêu vong dữTế bào phôi tửBất đồng, tế bào điêu vong bất thị nhất kiện bị động đích quá trình, nhi thị chủ động quá trình, tha thiệp cập nhất hệ liệt cơ nhân đích kích hoạt, biểu đạt dĩ cập điều khống đẳng đích tác dụng, tha tịnh bất thịBệnh lýĐiều kiện hạ, tự thể tổn thương đích nhất chủng hiện tượng, nhi thị vi canh hảo địa thích ứng sinh tồn hoàn cảnh nhi chủ động tranh thủ đích nhất chủng tử vong quá trình.
- Trung văn danh
- Tế bào điêu vong
- Ngoại văn danh
- Apoptosis
Mục lục
- 1Tế bào điêu vong
- 2Nghiên cứu lịch sử
- 3Khái niệm giải thích
- ▪Tế bào điêu vong dữ trình tự tính tử vong
- ▪Tế bào điêu vong dữ phôi tử đích khu biệt
- ▪Hình thái học biến hóa
- ▪Sinh vật hóa học biến hóa
- 4Quá trình cơ lý
- ▪Khải động giai đoạn
- ▪Chấp hành
- 5Caspase hoạt hóa cơ chế
- 6Caspase hiệu ứng cơ chế
- ▪Điêu vong ức chế vật
- ▪Phá phôi tế bào kết cấu
- ▪Điều tiết đản bạch công năng
- 7Điều tiết
Nhân thể nội đíchTế bàoChú định thị yếu tử vong đích, hữu ta tử vong thịSinh lýTính đích, hữu ta tử vong tắc thị bệnh lý tính đích, hữu quanTế bào tử vongQuá trình đích nghiên cứu, dĩ thành vi sinh vật học,Y họcNghiên cứu đích nhất cá nhiệt điểm. Nhân môn dĩ kinh tri đạo tế bào đích tử vong khởi mã hữu lưỡng chủng phương thức, tứcTế bào phôi tửDữ tế bào điêu vong ( apoptosis ). Tế bào phôi tử thị tảo dĩ bị nhận thức đáo đích nhất chủng tế bào tử vong phương thức, nhi tế bào điêu vong tắc thị trục tiệm bị nhận thức đích nhất chủng tế bào tử vong phương thức.
Tế bào điêu vong thị tế bào đích nhất chủng cơ bổn sinh vật học hiện tượng, tạiĐa tế bào sinh vậtKhứ trừ bất nhu yếu đích hoặc dị thường đích tế bào trung khởi trứ tất yếu đích tác dụng. Tha tạiSinh vật thểĐích tiến hóa,Nội hoàn cảnhĐích ổn định dĩ cập đa cá hệ thống đích phát dục trung khởi trứ trọng yếu đích tác dụng. Tế bào điêu vong bất cận thị nhất chủng đặc thù đích tế bào tử vong loại hình, nhi thả cụ hữu trọng yếu đích sinh vật học ý nghĩa cập phục tạp đích phân tử sinh vật học cơ chế.
Điêu vong thị đaCơ nhânNghiêm cách khống chế đích quá trình. Giá ta cơ nhân tại chủng chúc chi gian phi thường bảo thủ, như Bcl-2 gia tộc, caspase gia tộc,Nham cơ nhânNhư C-myc,Ức nham cơ nhânP35 đẳng, tùy trứPhân tử sinh vật học kỹ thuậtĐích phát triển đối đa chủng tế bào điêu vong đích quá trình hữu liễu tương đương đích nhận thức, đãn thị hất kim vi chỉ điêu vong quá trình xác thiết cơ chế thượng bất hoàn toàn thanh sở. Nhi điêu vong quá trình đích vẫn loạn khả năng dữ hứa đa tật bệnh đích phát sinh hữu trực tiếp hoặc gian tiếp đích quan hệ. Như thũng lựu,Tự thân miễn dịch tính tật bệnhĐẳng, năng cú dụ phát tế bào điêu vong đích nhân tố ngận đa, như xạ tuyến,Dược vậtĐẳng.
Nhân đích bộ phân sinh lý kết cấu chúc vu tự nhiên điêu vong, như nhân đích hữu vĩ giai đoạn, vĩ bộ tại phát dục quá trình trung tự động điêu vong.
Tổ chức trung tế bào điêu vong quá trình1． điêu vong khái niệm đích hình thành 1965 niênÚc đại lợi áKhoa học gia phát hiện, kết trát thử môn tĩnh mạch hậu, điện kính quan sát đáo can thật chất tổ chức trung hữu nhất ta tán tại đích tử vong tế bào, giá ta tế bào đíchDung môi thểTịnh vị bị phá phôi, hiển nhiên bất đồng vuTế bào phôi tử.Giá ta tế bào thể tích thu súc,Nhiễm sắc chấtNgưng tập, tòng kỳ chu vi đích tổ chức trung thoát lạc tịnh bị thôn phệ, cơ thể vô viêm chứng phản ứng. 1972 niên Kerr đẳng tam vị khoa học gia thủ thứ đề xuất liễu tế bào điêu vong đích khái niệm, tuyên cáo liễu đối tế bào điêu vong đích chân chính tham tác đích khai thủy, tại thử chi tiền, quan vuPhôi thaiPhát dục sinh vật học,Miễn dịch hệ thốngĐích nghiên cứu,Can tế bàoTử vong đích nghiên cứu đô vi giá nhất khái niệm đích đề xuất điện định liễu cơ sở.
1) lợi dụng quang kính hòa điện kính đốiHình thái họcĐặc chinh tiến hành liễu tường tế đích nghiên cứu.
2)Nhiễm sắc thểDNAĐích hàng giải: Tế bào điêu vong đích nhất cá hiển trứ đặc chinh tựu thị tế bào nhiễm sắc chất đích DNA hàng giải, điêu vong thời DNA đích đoạn phiến đại tiểu quy luật thị 200bp đích chỉnh sổ bội.
4) cái ly tử biến hóa, tế bào nội cái ly tử nùng độ đích thăng cao thị tế bào phát sinh điêu vong đích nhất cá trọng yếu điều kiện.
5) nội nguyên tínhHạch toanNội thiết môi: Tế bào phát sinh điêu vong thị nhu yếu giá chủng hạch toan nội thiết môi tham dữ đích.
3． tế bào điêu vong đích phân tử sinh vật học nghiên cứu giai đoạn.
1 ) dữ tế bào điêu vong đích tương quan cơ nhân cập điều khống.
3) dữ tế bào điêu vong đích các chủng phân tử cập kỳ tương hỗ tác dụng cập tương hỗ quan hệ.
4． tế bào điêu vong đích lâm sàng ứng dụng cơ sở nghiên cứu giai đoạn tế bào điêu vong đích nghiên cứu, kỳ sinh mệnh lực tại vu tối chung năng cú hữu lợi vu tậtBệnh cơChế đích xiển minh, dĩ cập tân liệu pháp đích tham tác cập vấn thế.
Kỳ thật tòng nghiêm cách đích từ học ý nghĩa thượng lai thuyết,Tế bào trình tự tính tử vong( PCD ) dữ tế bào điêu vong thị hữu ngận đại khu biệt đích. Tế bào trình tự tính tử vong đích khái niệm thị 1956 niên đề xuất đích,PCDThị cá công năng tính khái niệm, miêu thuật tại nhất cáĐa tế bào sinh vậtThể trung mỗ ta tế bào tử vong thị cá thể phát dục trung đích nhất cá dự định đích, tịnh thụ đáo nghiêm cách trình tự khống chế đích chính thường tổ thành bộ phân. Lệ như khoa đẩu biến thành thanh oa, kỳBiến tháiQuá trình trung vĩ bộ đích tiêu thất bạn tùy đại lượng tế bào tử vong, cao đẳng bộ nhũ loại động vật chỉ gian bốc đích tiêu thất, ngạc dung hợp, thị võng mô phát dục dĩ cập miễn dịch hệ thống đích chính thường phát dục đô tất tu hữu tế bào tử vong đích tham dữ. Giá ta hình hình sắc sắc đích tạiCơ thểPhát dục quá trình trung xuất hiện đích tế bào tử vong hữu nhất cá cộng đồng đặc chinh: Tức tán tại đích, trục cá địa tòng chính thường tổ chức trung tử vong hòa tiêu thất, cơ thể vô viêm chứng phản ứng, nhi thả đối chỉnh cá cơ thể đích phát dục thị hữu lợi hòa tất tu đích. Nhân thử nhận vi động vật phát dục quá trình trung tồn tại đích tế bào trình tự tính tử vong thị nhất cáPhát dụcHọc khái niệm, nhi tế bào điêu vong tắc thị nhất cá hình thái học đích khái niệm, miêu thuật nhất kiện hữu trứ nhất chỉnh sáo hình thái học đặc chinh đích dữ phôi tử hoàn toàn bất đồng đích tế bào tử vong hình thức. Đãn thị nhất bàn nhận viĐiêu vongHòa trình tự tính tử vong lưỡng cá khái niệm khả dĩ giao hỗ sử dụng, cụ hữu đồng đẳng ý nghĩa.
Thai nhi thủ đích phát dục quá trìnhTuy nhiên điêu vong dữ phôi tử đích tối chung kết quả cực vi tương tự, đãn tha môn đích quá trình dữ biểu hiện khước hữu ngận đại soa biệt.
Phôi tử ( necrosis ): Phôi tử thị tế bào thụ đáo cường liệt lý hóa hoặcSinh vật nhân tốTác dụng dẫn khởi tế bào vô tự biến hóa đích tử vong quá trình. Biểu hiện vi tế bào trướng đại,Bào mô phá liệt,Tế bàoNội dung vật ngoại dật, hạch biến hóa giác mạn,DNAHàng giải bất sung phân, dẫn khởi cục bộ nghiêm trọng đích viêm chứng phản ứng.
Điêu vong thị tế bào đối hoàn cảnh đích sinh lý tính bệnh lý tính thứ kíchTín hào,Hoàn cảnh điều kiện đích biến hóa hoặc hoãn hòa tính tổnThương sảnSinh đích ứng đáp hữu tự biến hóa đích tử vong quá trình. Kỳ tế bào cập tổ chức đích biến hóa dữ phôi tử hữu minh hiển đích bất đồng.
Quá trình
1, điêu vong khởi thủy
2, điêu vong tiểu thể hình thành
3, điêu vong tiểu thể trục tiệm bị lân cận đích tế bào hoặc thể nội thôn phệ tế bào sở thôn phệ, điêu vong tế bào đích tàn dư vật chất bị tiêu hóa hậu trọng tân lợi dụng.
Hình thái họcQuan sát tế bào điêu vong đích biến hóa thị đa giai đoạn đích, tế bào điêu vong vãng vãng thiệp cập đan cá tế bào, tức tiện thị nhất tiểu bộ phân tế bào dã thị phi đồng bộPhát sinhĐích. Thủ tiên xuất hiện đích thị tế bào thể tích súc tiểu, liên tiếp tiêu thất, dữ chu vi đích tế bào thoát ly, nhiên hậu thịTế bào chấtMật độ tăng gia,Tuyến lạp thểMô điện vị tiêu thất,Thông thấu tínhCải biến, thích phóngTế bào sắc tố CĐáoBào tương,Hạch chấtNùng súc,Hạch môHạch nhânPhá toái, DNA hàng giải thành vi ước 180bp-200bp phiến đoạn; bào mô hữu tiểu phao trạng hình thành, mô nội trắcLân chi tiên ti an toanNgoại phiên đáo mô biểu diện, bào mô kết cấu nhưng nhiên hoàn chỉnh, tối chung khả tương điêu vong tế bào di hài phân cát bao khỏa vi kỉ cáĐiêu vong tiểu thể,Vô nội dung vật ngoại dật, nhân thử bất dẫn khởi chu vi đích viêm chứng phản ứng, điêu vong tiểu thể khả tấn tốc bị chu vi chuyên chức hoặc phi chuyên chức thôn phệ tế bào thôn phệ.
Tế bào điêu vong2) đại phân tử hợp thành
Tế bào điêu vong đíchSinh hóaCải biến bất cận cận thị DNA đích hữu khống hàng giải, tại tế bào điêu vong đích quá trình trung vãng vãng hoàn hữu tân đích cơ nhân đích biểu đạt hòa mỗ ta sinh vậtĐại phân tửĐích hợp thành tác vi điều khống nhân tử. Như ngã môn thật nghiệm thất phát hiện đích TFAR-19 tựu thị tại tế bào điêu vong thời cao biểu đạt nhất chủng phân tử, tái như tạiĐường bì chất kích tốDụ đạo thử hung tuyến tế bào điêu vong quá trình trung, gia nhậpRNAHợp thànhỨc chế tềHoặcĐản bạch chấtHợp thành ức chế tề tức năng ức chế tế bào điêu vong đích phát sinh.
Tế bào điêu vong đích quá trình đại trí khả phân vi dĩ hạ kỉ cá giai đoạn:
Tiếp thụ điêu vong tín hào → điêu vong điều khống phân tử gian đích tương hỗ tác dụng → đản bạch thủy giải môi đích hoạt hóa ( Caspase ) → tiến nhập liên tục phản ứng quá trình
Tế bào điêu vongĐích khải động thịTế bàoTại cảm thụ đáo tương ứng đíchTín hào thứ kíchHậu bào nội nhất hệ liệt khống chế khai quan đích khai khải hoặc quan bế, bất đồng đích ngoại giới nhân tố khải động điêu vong đích phương thức bất đồng, sở dẫn khởi đích tín hào chuyển đạo dã bất tương đồng, khách quan thượng thuyết đối tế bào điêu vong quá trình trungTín hào truyện đệHệ thống đích nhận thức hoàn thị bất toàn diện đích, bỉ giác thanh sở đích thông lộ chủ yếu hữu:
1 ) tế bào điêu vong đíchMô thụ thểThông lộ: Các chủng ngoại giới nhân tố thị tế bào điêu vong đíchKhải động tề,Tha môn khả dĩ thông quá bất đồng đích tín hào truyện đệ hệ thống truyện đệ điêu vong tín hào, dẫn khởi tế bào điêu vong, ngã môn dĩ Fas -FasL vi lệ:
Fas thị nhất chủng khóa mô đản bạch, chúc vuThũng lựu phôi tử nhân tửThụ thểSiêu gia tộc thành viên, tha dữ FasL kết hợp khả dĩ khải động điêu vong tín hào đích chuyểnĐạo dẫnKhởi tế bào điêu vong. Tha đích hoạt hóa bao quát nhất hệ liệt bộ sậu: Thủ tiên phối thể dụ đạoThụ thểTam tụ thể hóa, nhiên hậu tạiTế bào môThượng hình thành điêu vong dụ đạo phục hợp vật, giá cá phục hợp vật trung bao quát đái hữuTử vong kết cấu vựcĐích Fas tương quan đản bạch FADD. Fas hựu xưng CD95, thị do 325 cáAn cơ toanTổ thành đíchThụ thể phân tử,Fas nhất đán hòa phối thể FasL kết hợp, khả thông quáFas phân tửKhải động trí tử tính tín hào chuyển đạo, tối chung dẫn khởi tế bào nhất hệ liệt đặc chinh tính biến hóa, sử tế bào tử vong. Fas tác vi nhất chủng phổ biến biểu đạt đích thụ thể phân tử, khả xuất hiện vu đa chủngTế bào biểu diện,Đãn FasL đích biểu đạt khước hữu kỳ đặc điểm, thông thường chỉ xuất hiện vu hoạt hóa đíchT tế bàoHòaNK tế bào,Nhân nhi dĩ bị hoạt hóa đích sát thương tínhMiễn dịch tế bào,Vãng vãng năng cú tối hữu hiệu địa dĩ điêu vong đồ kính tríBá tế bàoVu tử địa. Fas phân tử bào nội đoạn đái hữu đặc thù đích tử vong kết cấu vực ( DD,death domain ). Tam tụ hóa đích Fas hòa FasL kết hợp hậu, sử tam cá Fas phân tử đích tử vong kết cấu vực tương tụ thành thốc, hấp dẫn liễu bào tương trung lánh nhất chủng đái hữu tương đồng tử vong kết cấu vực đích đản bạch FADD. FADD thị tử vong tín hàoChuyển lụcTrung đích nhất cáLiên tiếp đản bạch,Tha do lưỡng bộ phân tổ thành: C đoan ( DD kết cấu vực ) hòa N đoan ( DED ) bộ phân. DD kết cấu vực phụ trách hòa Fas phân tử bào nội đoạn thượng đích DD kết cấu vực kết hợp, cai đản bạch tái dĩ DED liên tiếp lánh nhất cá đái hữu DED đích hậu tục thành phân, do thử dẫn khởi N đoạn DED tùy tức dữ vô hoạt tính đích bánQuang an toanĐản bạch môi8 ( caspase8 ) môi nguyên phát sinh đồng thị tính giao liên, tụ hợp đa cá caspase8 đích phân tử, caspase8 phân tử toại do đan liên môi nguyên chuyển thành hữu hoạt tính đích song liên đản bạch, tiến nhi dẫn khởi tùy hậu đích cấp liên phản ứng, tức Caspases, hậu giả tác vi môi nguyên nhi bị kích hoạt, dẫn khởi hạ diện đích cấp liên phản ứng. Tế bào phát sinh điêu vong. Nhân nhi TNF dụ đạo đích tế bào điêu vong đồ kính dữ thử loại tự
Tuyến lạp thể thị tế bàoSinh mệnh hoạt độngKhống chế trung tâm, tha bất cận thị tế bàoHô hấp liênHòa dưỡng hóa lân toan hóa đích trung tâm, nhi thả thị tế bào điêu vong điều khống trung tâm. Thật nghiệm biểu minh liễu tế bào sắc tố C tòng tuyến lạp thể thích phóng thị tế bào điêu vong đíchQuan kiện bộ sậu.Thích phóng đáo tế bào tương đích tế bào sắc tố C tại dATP tồn tại đích điều kiện hạ năng dữ điêu vong tương quanNhân tử1 ( Apaf-1 ) kết hợp, sử kỳ hình thànhĐa tụ thể,Tịnh xúc sử caspase-9 dữ kỳ kết hợp hình thànhĐiêu vong tiểu thể,caspase-9 bị kích hoạt, bị kích hoạt đích caspase-9 năng kích hoạt kỳ tha đích caspase như caspase-3 đẳng, tòng nhi dụ đạo tế bào điêu vong. Thử ngoại, tuyến lạp thể hoàn thích phóngĐiêu vong dụ đạo nhân tử,Như AIF, tham dữ kích hoạt caspase. Khả kiến, tế bàoĐiêu vong tiểu thểĐích tương quan tổ phân tồn tại vu chính thường tế bào đích bất đồng bộ vị. Xúc điêu vong nhân tử năng dụ đạo tế bào sắc tố C thích phóng hòa điêu vong tiểu thể đích hình thành. Ngận hiển nhiên, tế bào sắc tố C tòng tuyến lạp thể thích phóng đích điều tiết thị tế bào điêu vong phân tử cơ lý nghiên cứu đích quan kiện vấn đề. Đa sổ điêu vong thứ kích nhân tử thông quá tuyến lạp thể kích hoạt tế bào điêu vong đồ kinh. Hữu nhân nhận vi thụ thể giới đạo đích điêu vong đồ kinh dã hữu tế bào sắc tố C tòng tuyến lạp thể đích thích phóng. Như đối Fas ứng đáp đích tế bào trung, nhất loại tế bào ( type1 ) trung hàm hữu túc cú đích quang giải môi 8 ( caspase8 ) khả bịTử vong thụ thểHoạt hóa tòng nhi đạo trí tế bào điêu vong. Tại giá loại tế bào trung cao biểu đạt Bcl-2 tịnh bất năng ức chế Fas dụ đạo đích tế bào điêu vong. Tại lánh nhất loại tế bào ( type2 ) nhưCan tế bàoTrung, Fas thụ thể giới đạo đích quang giải môi 8 hoạt hóa bất năng đạt đáo ngận cao đích thủy bình. Nhân thử giá loại tế bào trung đích điêu vong tín hào nhu yếu tá trợ điêu vong đích tuyến lạp thể đồ kinh lai phóng đại, nhi Bid -- nhất chủng cận hàm hữu BH3Kết cấu vựcĐích Bcl-2 gia tộc đản bạch thị tương điêu vong tín hào tòng quang giải môi 8 hướng tuyến lạp thể truyện đệ đích tín sử.
Tẫn quản điêu vong quá trình đích tường tế cơ chế thượng bất hoàn toàn thanh sở, đãn thị dĩ kinh xác định Caspase tức bán quang thiên đông đản bạch môi tại điêu vong quá trình trung thị khởi trứ tất bất khả thiếu đích tác dụng, tế bào điêu vong đích quá trình thật tế thượng thị Caspase bất khả nghịch hữu hạn thủy giải để vật đích cấp liên phóng đại phản ứng quá trình, đáo mục tiền vi chỉ, chí thiếu dĩ hữu 14 chủng Caspase bị phát hiện, Caspase phân tử gian đích đồng nguyên tính ngận cao, kết cấu tương tự, đô thị bán quang an toan gia tộc đản bạch môi, căn cư công năng khả bả Caspase cơ bổn phân vi nhị loại: Nhất loại tham dữ tế bào đích gia công, như Pro-IL-1β hòa Pro-IL-1δ, hình thành hữu hoạt tính đích IL-1β hòa IL-1δ; đệ nhị loại tham dữTế bàoĐiêu vong, bao quát caspase2,3,6,7,8,9.10.Caspase gia tộcNhất bàn cụ hữu dĩ hạ đặc chinh:
1)C đoan đồng nguyên khu tồn tại bán quang an toan kích hoạt vị điểm, thử kích hoạt vị điểm kết cấu vực vi QACR/QG.
2) thông thường dĩMôi nguyênĐích hình thức tồn tại,Tương đối phân tử chất lượng29000-49000(29-49KD ), tại thụ đáo kích hoạt hậu kỳ nội bộ bảo thủ đíchThiên đông an toanTàn cơKinh thủyGiải hình thành đại ( P20 ) tiểu ( P10 ) lưỡng cá á đan vị, tịnh tiến nhi hình thành lưỡng lưỡng tổ thành đích hữu hoạt tính đíchTứ tụ thể,Kỳ trung, mỗi cá P20/P10 dị nhị tụ thể khả lai nguyên vu đồng nhất tiền thể phân tử dã khả lai nguyên vu lưỡng cá bất đồng đích tiền thể phân tử.
3) mạt đoan cụ hữu nhất cá tiểu đích hoặc đại đích nguyên kết cấu vực.
Tham dữ dụ đạo điêu vong đích Caspase phân thành lưỡng đại loại: Khải động môi ( inititaor ) hòa hiệu ứng môi ( effector ) tha môn phân biệt tại tử vong tín hào chuyển đạo đích thượng du hòa hạ du phát huy tác dụng.
Caspase đích hoạt hóa thị hữu thuận tự đích đa bộ thủy giải đích quá trình, Caspase phân tử các dị, đãn thị tha môn hoạt hóa đích quá trình tương tự. Thủ tiên tại caspase tiền thể đích N- đoan tiền thái hòa đại á cơ chi gian đích đặc định vị điểm bị thủy giải khứ trừ N- đoan tiền thái, nhiên hậu tái tại đại tiểu á cơ chi gian thiết cát thích phóng đại tiểu á cơ, do đại á cơ hòa tiểu á cơ tổ thành dịNguyên nhị tụ thể,Tái do lưỡng cá nhị tụ thể hình thành hữu hoạt tính đích tứTụ thể.Khứ trừ N- đoan tiền thái thị Caspase đích hoạt hóa đích đệ nhất bộ, dã thị tất tu đích, đãn thị Caspase-9 đích hoạt hóa bất nhu yếu khứ trừ N- đoanTiền thái,Caspase hoạt hóa cơ bổn hữu lưỡng chủng cơ chế, tức đồng nguyên hoạt hóa hòa dị nguyên hoạt hóa, giá lưỡng chủng hoạt hóa phương thức mật thiết tương quan, nhất bàn lai thuyết hậu giả thị tiền giả đích kết quả, phát sinh đồng nguyên hoạt hóa đích Caspase hựu bị xưng vi khải động caspase ( initiator caspase ), bao quát caspase-8,-10,-9, dụ đạo điêu vong hậu, khởi thủy Caspase thông quá adaptor bị mộ tập đáo đặc định đích khởi thủy hoạt hóa phục hợp thể, hình thành đồng nguyên nhị tụ thể cấu tượng cải biến, đạo trí đồng nguyên phân tử chi gian đích môi thiết nhi tự thân hoạt hóa, thông thường caspase-8,10,2 giới đạo tử vong thụ thể thông lộ đích tế bào điêu vong, phân biệt bị mộ tập đáo Fas hòa TNFR1 tử vong thụ thể phục hợp vật, nhi Caspase-9 tham dữ tuyến lạp thể thông lộ đích tế bào điêu vong, tắc bị mộ tập đáo Cyt c/d ATP/Apaf-1 tổ thành đích điêu vong thể ( apoptosome ). Đồng nguyên hoạt hóa thị tế bào điêu vong quá trình trung tối tảo phát sinh đích capases thủy giải hoạt hóa sự kiện, khải động Caspase hoạt hóa hậu, tức khai khải tế bào nội đích tử vong trình tự, thông quá dị nguyên hoạt hóa phương thức thủy giải hạ du Caspase tươngĐiêu vongTín hào phóng đại, đồng thời tương tử vong tín hào hướng hạ truyện đệ. Dị nguyên hoạt hóa ( hetero-activation ) tức do nhất chủng caspase hoạt hóa lánh nhất chủng caspase thị điêu vong đản bạch môi đích môi nguyên bị hoạt hóa đích kinh điển đồ kính. Bị dị nguyên hoạt hóa đích Caspase hựu xưng vi chấp hành caspase (
Điêu vong tế bào đích đặc chinh tính biểu hiện, bao quát DNA liệt giải vi 200bp tả hữu đích phiến đoạn, nhiễm sắc chất nùng súc, tế bào mô hoạt hóa, tế bào trứu súc, tối hậu hình thành do tế bào mô bao khỏa đích điêu vong tiểu thể, nhiên hậu, giá ta điêu vong tiểu thể bị kỳ thaTế bàoSở thôn phệ, giá nhất quá trình đại ước kinh lịch 30-60 phân chung, Caspase dẫn khởi thượng thuật tế bào điêu vong tương quan biến hóa đích toàn quá trình thượng bất hoàn toàn thanh sở, đãn chí thiếu bao quát dĩ hạ tam chủng cơ chế:
Tế bào điêu vongCaspase khả trực tiếp phá phôiTế bào kết cấu,Như liệt giảiHạch tiêm tằng,Hạch tiêm tằng ( Lamina ) thị doHạch tiêm tằng đản bạchThông quá tụ hợp tác dụng nhi liên thành đầu vĩ tương tiếp đích đa tụ thể, do thử hình thành hạch mô đích cốt giá kết cấu, sử nhiễm sắc chất (chromatin) đắc dĩ hình thành tịnh tiến hành chính thường đích bài liệt. Tại tế bào phát sinh điêu vong thời, hạch tiêm tằng đản bạch tác vi để vật bịCaspaseTại nhất cá cận trung bộ đích cố định bộ vị sở liệt giải, tòng nhi sử hạch tiêm tằng đảnBạch băngGiải, đạo trí tế bào nhiễm sắc chất đích cố súc.
Caspase khả tác dụng vu kỉ chủng dữTế bào cốt giáĐiều tiết hữu quan đích môi hoặc đản bạch, cải biến tế bào kết cấu. Kỳ trung bao quát ngưngGiao nguyên đản bạch( gelsin ), tụ hợp niêm phụ kích môi ( focal adhesion kinase,FAK ), P21 hoạt hóa kích môi α ( PAKα ) đẳng. Giá ta đản bạch đích liệt giải đạo trí kỳ hoạt tính hạ hàng. Như Caspase khả liệt giải ngưng giao nguyên đản bạch nhi sản sinh phiến đoạn, sử chi bất năng thông quáCơ động đản bạch( actin ) tiêm duy lai điều tiết tế bào cốt giá.
Trừ thử chi ngoại, Caspase hoàn năng diệt hoạt hoặc hạ điều dữDNA tu phụcHữu quan đích môi,mRNATiễn thiết đản bạch hòa DNAGiao liên đản bạch.Do vu DNA đích tác dụng, giá ta đản bạch công năng bị ức chế, sử tế bào đích tăng thực dữ phục chế thụ trở tịnh phát sinh điêu vong.
Sở hữu giá ta đô biểu minh Caspase dĩ nhất chủng hữu điều bất vẫn đích phương thức tiến hành "Phá phôi", tha môn thiết đoạn tế bào dữ chu vi đích liên hệ, sách tánTế bào cốt giá,Trở đoạn tế bàoDNAPhục chế hòa tu phục, càn nhiễu mRNA tiễn thiết, tổn thươngDNADữ hạch kết cấu, dụ đạo tế bào biểu đạt khả bị kỳ tha đích tế bào thôn phệ đích tín hào, tịnh tiến nhất bộ sử chi hàng giải viĐiêu vong tiểu thể.
Tế bào điêu vong thụ đáo nghiêm cách điều khống, tại chính thường tế bàoCaspaseXử vu phi hoạt hóa đích môi nguyên trạng thái, điêu vong trình tự nhất đán khai thủy, Caspase bị hoạt kinh tùy hậu phát sinh điêu vong đản bạch môi đích tằng điệp cấp liên phản ứng, phát sinh bất khả nghịch đích điêu vong —— tế bào điều tiết tế bào điêu vong đích cử lệ như hạ.
Hất kim vi chỉ, nhân loại dĩ phát hiện đa chủng điêu vong ức chế phân tử, bao quát P35, CrmA,IAPs, FLIPs dĩ cập Bcl-2 gia tộc đích điêu vong ức chế phân tử.
1)P35 hòa CrmA thị quảng phổ điêu vong ức chế tề, thể ngoại nghiên cứu kết quả biểu minh P35 dĩ cạnh tranh tính kết hợp phương thức dữ bá phân tử hình thành ổn định đích cụ hữuKhông gian vị trở hiệu ứngĐích phục hợp thể tịnh thả ức chếCaspasesHoạt tính, đồng thời P35 tại vị điểm DMQD! G bị bá Caspases đặc dị thiết cát, thiết cát hậu đích P35 dữ caspase đích kết hợp canh cường, CrmA ( Cytokine response modfer A ) thị huyết thanhĐản bạch môi ức chế tề,Năng cú trực tiếp ức chế đa chủng đản bạch môi đích hoạt tính, đãn hoàn vị phát hiện tại bộ nhũ động vật trung phát hiện P35 hòa CrmA đích đồng nguyên phân tử.
2)FLIPs(FLICE-imhibirory proterins ) năng ức chế Fas/TNFR1 giới đạo đíchTế bào điêu vong.Tha hữu đa chủngBiến dị thể,Đãn kỳ N- đoan công năng tiền khu (Prodomain) hoàn toàn tương đồng, C đoan trường đoản bất nhất. FLIPs thông quá DED công năng khu, dữ FADD hòa Caspase-8, 10 kết hợp, kiết kháng tha môn chi gian đích tương hỗ tác dụng, tòng nhi ức chế Caspase8, 10 mộ tập đáo tử vong thụ thể phục hợp thể hòa tha môn đích khởi thủy hóa.
3 ) điêu vong ức chế đản bạch ( IAPs,inhibitors ofApoptosisprotien ) vi nhất tổ cụ hữu ức chế điêu vong tác dụng đích đản bạch chất, thủ tiên thị tòng can trạngBệnh độcCơ nhân tổ khắc long đáo, phát hiện năng cú ức chế do bệnh độc cảm nhiễm dẫn khởi đíchTúc chủ tế bàoTử vong ứng đáp. Kỳ đặc tính thị hữu đại ước 20 an cơ toan tổ thành đích công năng khu, giá đối IAPs ức chế điêu vong thị tất nhu yếu đích, tha môn chủ yếu ức chế Caspase3,-7, nhi bất kết hợp tha đích môi nguyên, đối Caspase tắc tức khả dĩ kết hợp hoạt hóa đích, hựu khả kết hợp môi nguyên, tiến nhi ức chếTế bàoĐiêu vong.
Giá nhất gia tộc hữu chúng đa thành viên, như Mcl-1, NR-B, A1, Bcl-w, Bcl-x, Bax, Bak, Bad, Bim đẳng, tha môn phân biệt kí hữu kháng điêu vong tác dụng, dã hữu xúc điêu vong đích tác dụng. Đa sổ thành viên gian hữu lưỡng cá kết cấu đồng nguyên khu vực, tại giới đạo thành viên chi gian đích nhị tụ thể hóa quá trình trung khởi trọng yếu tác dụng. Bcl-2 thành viên chi gian đích nhị tụ thể hóa thị thành viên chi gian công năng thật hiện hoặc công năng điều tiết đích trọng yếu hình thức. Bcl-2 sinh lý công năng thị trở át tế bào điêu vong, diên trường tế bào thọ mệnh, tại nhất taBạch huyết bệnhTrung Bcl-2 trình quá độ biểu đạt.
Bcl-2 đíchÁ tế bào định vịDĩ kinh minh xác, tha tại bất đồng đích tế bào loại hình khả dĩ định vị vu tuyến lạp thể,Nội chất võngDĩ cập hạch mô thượng, tịnh thông quá trở chỉ tuyến lạp thểTế bào sắc tố CĐích thích phóng nhi phát huy kháng điêu vong tác dụng. Thử ngoại, Bcl-2 cụ hữu bảo hộ tế bào đích công năng, Bcl-2 đích quá độ biểu đạt khả dẫn khởiTế bào hạchCốc quang đại thái( GSH ) đíchTích tụ,Đạo trí hạch nộiDưỡng hóa hoàn nguyênBình hành đích cải biến, tòng nhi hàng đê liễu Caspase đích hoạt tính. Bax thị Bcl-2 gia tộc trung tham dữ tế bào điêu vong đích nhất cá thành viên, đương dụ đạo điêu vong thời, tha tòng bào dịch thiên di đáo tuyến lạp thể hòa hạch mô. Hữu nhân nghiên cứu phát hiện,Tế bào độc tính dược vậtDụ phát điêu vong thời, hạch mô Bax thủy bình đích thượng thăng dữ lamin cập PARP lưỡng chủngHạch đản bạchĐích hàng giải trình chính tương quan. Dụng Bax quảHạch đại toanXử lý đích tế bào, chỉ năng đặc dị địa trở đoạnLaminĐích hàng giải, đốiPARPĐích hàng giải bất khởi tác dụng.Giá chủng hiệu ứng đích điều khống cơ chế nhưng nhiên bất thanh sở.
Tổng chi, tế bào điêu vong đích điều tiết thị phi thường phục tạp đích, tham dữ đích phân tử dã phi thường đa, hoàn hữu ngận đa bất vi ngã môn sở tri đích cơ lý nhu yếu ngã môn nhất bộ đích tham tác.
1)Hung tuyến tế bàoThành thục quá trình trung đích điêu vong: Hung tuyến tế bào kinh quá nhất hệ liệt đích phát dục quá trình nhi thành vi các chủng loại hình đíchMiễn dịch hoạt tính tế bào.Tại giá nhất phát triển quá trình trung, thiệp cập liễu nhất hệ liệt đích dương tính tế bào tuyển trạch hòa âm tính tế bào tuyển trạch quá trình. Dĩ hình thành CD4+ đích TLâm ba tế bàoÁ hình cập CD8+ đíchT lâm ba tế bàoÁ hình; đồng thời, đối thức biệt tự thân kháng nguyên đích TTế bào khắc longTiến hànhTuyển trạch tínhĐịa tiêu trừ, kỳ tế bào khắc long tử vong đích cơ chế chủ yếu thị thông quáTrình tự tính tế bào tử vong.Nhân thử, chính thường đích miễn dịch hệ thống phát dục đích kết cục, kí hình thành liễu hữu miễn dịch hoạt tính đích lâm ba tế bào, hựu sản sinh liễu đối tự thân kháng nguyên đíchMiễn dịch nại thụ.Nại thụ cơ chế đích hình thành, chủ yếu kháo thức biệt tự thân kháng nguyên đích T lâm ba tế bào khắc long đích trình tự tính tế bào tử vong cơ chế đích hoạt hóa.
Tế bào điêu vongTế bào điêu vong chi sở dĩ thành vi nhân môn nghiên cứu đích nhất cá nhiệt điểm, tại ngận đại trình độ thượng quyết định vu tế bào điêu vong dữ lâm sàng bệnh độc đích mật thiết quan hệ. Giá chủng quan hệ bất cận biểu hiện tại điêu vong cập kỳ cơ chế đích nghiên cứu, xiển minh liễu nhất đại loại miễn dịch bệnh đích phát bệnh cơ chế, nhi thả do thử khả dĩ đạo trí tật bệnh tân liệu pháp đích xuất hiện, đặc biệt thị tế bào điêu vong dữ thũng lựu cập ngải tư bệnh chi gian đích mật thiết quan hệ bội thụ nhân môn trọng thị.
1) HIV bệnh độc cảm nhiễm tạo thành CD4+ tế bào giảm thiếu thị thông quá tế bào điêu vong cơ chế
HIV cảm nhiễm dẫn khởi ngải tư bệnh, kỳ chủ yếu đích phát bệnh cơ chế thị HIV cảm nhiễm hậuĐặc dị tínhĐịa phá phôi CD4+ tế bào, sử CD4+ dĩ cập dữ kỳ tương quan đích miễn dịch công năng khuyết hãm, dịch chiêu trí cơ hội tính cảm nhiễm cập thũng lựu, đãn HIV cảm nhiễm hậu chẩm dạng đặc dị tính phá phôiCD4+ tế bàoNi? Nhất bàn nhận vi, CD4+TLâm ba tế bàoTuyệt đối sổ hiển trứ giảm thiếu đích nguyên nhân, chủ yếu thị thông quá tế bào điêu vong cơ chế tạo thành đích. Giá bất cận xiển minh liễu AIDS thờiCD4+T tế bàoGiảm thiếu đích chủ yếu nguyên nhân, đồng thời dã viAIDSĐích trị liệu nghiên cứu chỉ minh liễu nhất cá trọng yếu đíchTham tácPhương hướng.
2) tòng tế bào điêu vong giác độ khán, thũng lựu đích phát sinh thị do vu điêu vong thụ trở sở trí
Nhất bàn nhận vi ác tính chuyển hóa đích thũng lựu tế bào thị nhân viThất khốngSinh trường, quá độ tăng thực, tòng tế bào điêu vong đích giác độ khán tắc nhận vi thị thũng lựu đích điêu vong cơ chế thụ đáo ức chế bất năng chính thường tiến hành tế bào tử vong thanh trừ đích kết quả. Thũng lựu tế bào trung hữu nhất hệ liệt đích nham cơ nhân hòaNguyên nham cơ nhânBị kích hoạt, tịnh trình quá biểu đạt trạng thái. Giá ta cơ nhân đích kích hoạt hòa thũng lựu đích phát sinh phát triển chi gian hữu trứ cực vi mật thiết đích quan hệ. Nham cơ nhân trung nhất đại loại chúc vu sinh trường nhân tử gia tộc, dã hữu nhất đại loại chúc vuSinh trường nhân tử thụ thểGia tộc, giá ta cơ nhân đích kích hoạt dữ biểu đạt, trực tiếp thứ kích liễu thũng lựu tế bào đích sinh trường, giá ta nham cơ nhân cập kỳ biểu đạtSản vậtDã thị tế bào điêu vong đích trọng yếuĐiều tiết nhân tửHứa đa chủng loại đích nhamCơ nhân biểu đạtDĩ hậu, tức trở đoạn liễu thũng lựu tế bào đích điêu vong quá trình, sử thũng lựu tế bào sổ mục tăng gia, nhân thử, tòngTế bào điêu vongGiác độ lai lý giảiThũng lựuĐích phát sinh cơ chế, thị do vu thũng lựu tế bào đích điêu vong cơ chế, thũng lựu tế bào giảm thiếu thụ trở sở trí. Nhân thử, thông quá tế bào điêu vong giác độ hòa cơ chế lai thiết kế đối thũng lựu đích trị liệu phương pháp tựu thị trọng kiến thũng lựu tế bào đích điêu vong tín hào chuyển đệ hệ thống, tức ức chế thũng lựu tế bào đích sinh tồn cơ nhân đích biểu đạt, kích hoạt tử vong cơ nhân đích biểu đạt.
Tự thân miễn dịch bệnh bao quát nhất đại loại nan trị tính đích miễn dịch vẫn loạn nhi tạo thành đích tật bệnh, tự thân phản ứng tính T lâm ba tế bào cập sản sinh kháng thể đíchB lâm ba tế bàoThị dẫn khởi tự thân miễn dịch bệnh đích chủ yếu miễn dịchBệnh lýCơ chế, chính thường tình huống hạ, miễn dịch tế bào đích hoạt hóa thị nhất cá cực vi phục tạp đích quá trình. Tại tự thân kháng nguyên đích thứ kích tác dụng hạ, thức biệt tự thân kháng nguyên đích miễn dịch tế bào bị hoạt hóa, tòng nhi thông quá tế bào điêu vong đích cơ chế nhi đắc đáo thanh trừ. Đãn như giá nhất cơ chế phát sinh chướng ngại, na ma thức biệt tự thân kháng nguyên đích miễn dịch hoạt tính tế bào đích thanh trừ tựu hội sản sinh chướng ngại. Hữu nhân quan sát đáo tại lâm ba tăng sinh đột biến tiểu thử trung quan sát đáo Fas biên mã đích cơ nhân dị thường, bất năngPhiên dịchChính thường đích Fas khóa mô đản bạch phân tử, như Fas dị thường, do kỳ giới đạo đích điêu vong cơ chế dã đồng thời thụ trở, tiện tạo thành lâm ba tế bào tăng thực tính đích tự thân miễn dịch tật hoạn.
4)Thần kinh hệ thốngĐích thối hành tính bệnh biến:Lão niên tính si ngốcThịThần kinhTế bào điêu vong đích gia tốc nhi sản sinh đích.A nhĩ tì hải mặc bệnh( AD ) thị nhất chủng bất khả nghịch đích thối hành tính thần kinh tật bệnh,Điến phấnDạng tiền thể đản bạch ( APP ) tảo lãoĐản bạch-1 ( PS1 ) tảo lão đản bạch -2 ( PS2 ) đích đột biến đạo trí gia tộc tính a nhĩ tì hải mặc bệnh ( FAD ). Nghiên cứu chứng minh PS tham dữ liễu thần kinh tế bào điêu vong đích điều khống PS1, PS2 đích quá biểu đạt năng tăng cường tế bào đối điêu vong tín hào đích mẫn cảm tính.Bcl-2 cơ nhânGia tộc lưỡng cá thành viên Bcl-xl hòa Bcl-2 tham dữ đối tế bào điêu vong đích điều tiết.
Tuyến lạp thể thịChân hạch tế bàoĐích trọng yếu tế bào khí, thịĐộng vật tế bàoSinh thành ATP đích chủ yếu địa điểm.Tuyến lạp thể cơ chấtĐíchTam thoa toan tuần hoànMôi hệ thông quá để vật thoát khinh dưỡng hóa sinh thànhNADH.NADH thông quáTuyến lạp thể nội môHô hấp liênDưỡng hóa. Dữ thử đồng thời, đạo trí khóa môChất tửDi vị hình thành khóa mô chất tử thê độ hòa / hoặc khóa mô điện vị. Tuyến lạp thể nội mô thượng đíchATPHợp thành môiLợi dụng khóa môChất tửThê độNăng lượngHợp thành ATP. Hợp thành đích ATP thông quá tuyến lạp thể nội mô ADP/ATP tái thể dữ tế bào chất trung ADP giao hoán tiến nhập tế bào chất, tham dữ tế bào đích các chủng nhu năng quá trình.
1951 niên, ba lê đệ bát đại học vinh dự giáo thụGlucksmannĐề xuất chính thườngTích chuyĐộng vật phát dục trung đích tế bào tử vong. 1966 niên,SaundersĐề xuất tạiHình thái phát sinhTrung tế bào tử vong. 1972 niên, Kerr đề xuất tế bào điêu vong ( apoptosis ), thuyết minh giá thị tại tổ chức động lực học phương diện hữu quảng phiếm tác dụng đích nhất chủng cơ bổn sinh vật học hiện tượng. 1974 niên, Lockshin đề xuất tế bào trình tự tính tử vong. Mỹ quốc ma tỉnh lý công học viện giáo thụHorvitzTại nghiên cứuTuyến trùngPhát dục thời phát hiện tuyến trùng đích mỗi cá tế bào đích vị trí, phân liệt dữ mệnh vận đô thị doDi truyệnQuyết định đích trình tự sở tinh xác địa dự tiên xác định đích. Tại cấu thành thành trùng thể thời hữu 1090 cá tế bào đản sinh, 131 cá tế bào tử vong. 1993 niên, cáp phật đại học y học viện tế bào sinh vật học hệ chung thân giáo thụViên quân anhPhát hiện tuyến trùng đíchTử vong cơ nhânced-3 đích sản vật tại kết cấu hòa công năng thượng dữ bộ nhũ loạiBạch tế bàoGiới tố 1βChuyển hoán môiHữu đồng nguyên tính. Thử hậu, chúc vu đồng nhất gia tộc đích thập kỉ cá tương quan cơ nhân lục tục tại bộ nhũ động vật cơ nhân tổ trung bị phát hiện. Thống xưng vi quang đông thái môi ( caspases ). 1994 niên, thụy sĩ tô lê thế đại học phân tử sinh mệnh khoa học nghiên cứu sở Hengartner phát hiện tuyến trùng đích tồn hoạt cơ nhân ced-9 đích sản vật dữ bộ nhũ động vật nguyênNham cơ nhânbcl-2Đích sản vật tương tự.
Tế bào điêu vong đích đặc chinh thị tế bào do vu hàng giải môi, chủ yếu thịThủy giảiMôi ( đản bạch môi dữ hạch toan môi ) đích tác dụng, tại cận hồ chính thường đích tế bàoChất môNội xu hướng tử vong. Giá dữ phôi tử thờiTế bào chất môTảo kỳ phá tổn bất đồng. Tại tế bào điêu vong quá trình trung, chất môChi song tằngTang thất nhị trắc bất đối xưng tính,Lân chi tiên ti an toanBạo lộ vu tế bào biểu diện, tòng nhi đạo trí bị thôn phệ.
Hữu lục tục báo đạo thuyết minh tuyến lạp thể khóa mô điện vị đích háo tán tảo vu hạch toan môi đích kích hoạt, dã tảo vuLân chỉ tiên ti an toanBạo lộ vu tế bào biểu diện. Nhi nhất đán tuyến lạp thể khóa mô điện vị háo tán, tế bào tựu hội tiến nhập bất khả nghịch đích điêu vong quá trình. Tuyến lạp thể giải liên đích hô hấp liên hội sản sinh đại lượng hoạt tính dưỡng, dưỡng hóa tuyến lạp thể nội mô thượng đích tâmLân chi.Thật nghiệm chứng minh, dụng giải ngẫu liên tềmClCCPHội đạo trí lâm ba tế bào điêu vong. Nhi như quả năng ổn định tuyến lạp thể khóa mô điện vị tựu năng phòng chỉ tế bào điêu vong.
Tại tế bào điêu vong quá trình trung tuyến lạp thể khóa mô điện vị đích háo tán chủ yếu thị do vu tuyến lạp thể nội mô đích thông thấu tính chuyển biến, giá thị do vu sinh thành liễu động thái đích do đa cáĐản bạch chấtTổ thành đích vị vu tuyến lạp thể nội mô dữ ngoại mô tiếp xúc vị điểm đích thông thấu tính chuyển biến khổng đạo ( PT khổng đạo ) ( đồ 1 ). PT khổng đạo do tuyến lạp thể các bộ phân đích đản bạch chất dữ tế bào chất trung đản bạch chất liên hợp cấu thành. Giá bao quátTế bào dịch đản bạch:Kỷ đường kích môi,Tuyến lạp thểNgoại mô đản bạch: Ngoại chu bổn tịnh nhị tần (benzodiazepine) thụ thể dữ điện áp y lạiÂm ly tửThông đạo, tuyến lạp thể mô gian gian khích đản bạch:Cơ toan kích môi,Tuyến lạp thể nội mô đản bạch: ADP-ATP tái thể, tuyến lạp thể cơ chất đản bạch:Thân hoàn đản bạchD (
Thông quá nhất ta thật nghiệm thất đích nghiên cứu, dĩ hạ chư điểm trị đắc chỉ xuất: ⑴ tuyến lạp thể nội mô thông thấu tính chuyển biến kí thị tế bào điêu vong đích tất tu điều kiện, dã thị tha đích sung túc điều kiện. ⑵PT khổng đạo đả khai hậu đạo trí tuyến lạp thể hứa đa công năng đích trí mệnh tính biến hóa tòng nhi khải động liễu tử vong đồ kính. ⑶PT khổng đạo tác vi hứa đa sinh lý hiệu ứng đích cảm thụ khí ( nhị giới dương ly tử,ATP,ADP,NAD,ΔΨm, pH, khưu cơ dữ đa thái ), chỉnh hợp liễu điện sinh lý, dưỡng hóa hoàn nguyên dữ tế bào đại tạ trạng thái đích tín tức. ⑷PT khổng đạo đích tổ thành thành phân ADP-ATP tái thể thị năng lượng đại tạ đích trọng yếu phân tử, do vu ADP-ATP tái thể thị do nhất cáCơ nhân gia tộcĐích kỉ cá thành viên sởBiên mã,Tha đích biểu đạt hữu nghiêm cách đích tổ chức chuyên nhất tính. Nhân thử, PT khổng đạo tại bất đồng tế bào trung đích điều tiết khả năng sảo hữu bất đồng. ⑸PT khổng đạo đích tác dụng hữu tự phóng đại đích hiệu ứng. PT dụ đạo ΔΨm háo tán, nhi phản quá lai mClCCP sử ΔΨm khứ cực hóa hội đạo trí PT. Nhất ta PT đích kết quả lệ như ΔΨm háo tán, hoạt tính dưỡng đích sinh thành bổn thân dã hội đạo trí PT. Giá tựu thuyết minh PT hội hữu chính phản quỹ, tòng nhi tại tế bào điêu vong trung hữu tự tồi hủy đích tác dụng. Phản quá lai, như quả năng phòng chỉ ΔΨm đích háo tán, tựu năng tị miễn dưỡng hóa hoàn nguyên bất bình hành, lân chỉ tiên ti an toan đích bạo lộ dữ đản bạch môi hòa hạchToan môiĐích kích hoạt.
PT khổng đạo hữu khai phóng dữ quan bế nhị chủng cấu tượng. PT khổng đạo khai phóng đạo trí tế bào điêu vong. Nhi PT khổng đạo quan bế năng phòng chỉ tế bào điêu vong. Đương PT khổng đạo dữHoàn bào khuẩn tố A( cyclosporin A ) hoặc SH, hoặc mễ diếu khuẩn toan ( bongkrek acid ) kết hợp thời PT khổng đạo bị quan bế. Tại PT khổng đạo khai phóng thời tuyến lạp thể thích phóng tế bào điêu vong dụ đạo nhân tử ( AIF ). AIF khả năng thị nhất chủng đản bạch thủy giải môi, vị vu tuyến lạp thể mô gian gian khích, tha năng bị đản bạch môi ức chế tề như N-Biện dưỡng thang cơ-Hiệt an tiên-Bính an tiên-Môn đông an tiên phất giáp cơ đồng(PTKhổng đạo đích tác dụng tịnh bất tương đồng. Thương thuật đại xúc tiến PT thông đạo khai phóng. Giá khả năng dữ nhị chủng ức chế tề hòa ADP-ATP tái thể đích kết hợp bộ vị bất đồng hữu quan. Thương thuật đại chỉ năng dữ ADP-ATP tái thể đích bào dịch trắc kết hợp nhi mễ diếu khuẩn toan khả dữ ADP-ATP tái thể đích bào dịch cập cơ chất nhị trắc kết hợp.
⑴ nhược tương thuần hóa đích chính thường đích tuyến lạp thể dữ thuần hóa đích tế bào hạch tại nhất khởiBảo ôn,Tịnh bất đạo trí tế bào hạch đích biến hóa. Đãn nhược tương dụ đạo sinh thành PT khổng đạo đích tuyến lạp thể dữ thuần hóa đích tế bào hạch nhất đồng bảo ôn, tế bào hạch tức khai thủy điêu vong biến hóa. ⑵ tế bào tử vong điều tiết đản bạch bất luận thị ức chế tử vong đích bcl-2 gia tộc hoàn thị xúc tiến tế bào tử vong đích Bax gia tộc quân dĩ tuyến lạp thể tác vi bá tế bào khí. bcl-2 đản bạch đích C đoan đích sơ thủy thái đoạn năng sáp nhập tuyến lạp thể ngoại mô. Sự thật thượng tương đương lượng đích bcl-2 vị vu tuyến lạp thểNội ngoạiMô đích tiếp xúc vị điểm. ⑶ cao biểu đạt bcl-2 năng phòng chỉ ΔΨm đích háo tán, tòng nhi đạo trí đối thương thuật đại, nguyên bổ lâm IX dữ mClCCP đích bất mẫn cảm dữ AIF thích phóng đích ức chế; phản chi, cao biểu đạt Bax tắc đạo trí ΔΨm đích háo tán.
Tổng thượng sở thuật, tế bào điêu vong dữ tuyến lạp thể đích kết cấu dữ công năng hữu trứ mật thiết đích quan hệ. Như quả tuyến lạp thể hữu đại lượng PT khổng đạo hình thành, tế bào ATP nùng độ ngận khoái hạ hàng, tắc tại trí điêu vong đích đản bạch môi bị hoạt hóa tiền tế bào tựu phôi tử liễu. Nhi như quả PT khổng đạo đích dụ đạo sinh thành thị nhất chủng bỉ giác hoãn hòa dữ trì tục đích trạng thái, tại tế bào ATP nùng độ hạ hàng tiền chuyên nhất đíchĐản bạch môiBị kích hoạt; nhi lánh nhất phương diện ΔΨm đíchHáo tánSản sinh đích siêu dưỡng âm ly tử tắc đạo tríTế bào tử vong.Tế bào điêu vong thị nhất bả song nhận kiếm. Nhất phương diện thị cơ thể phát dục đích chính thường quá trình, lánh nhất phương diện như quả tế bào điêu vong quá tốc, tắc hội đạo trí mạn tính thối hành tính bệnh biến; như quả tế bào bất điêu vong tựu hữu khả năng đạo trí nham biến hoặc đối hóa liệu đích bất mẫn cảm. Tiến nhất bộ nghiên cứu tuyến lạp thể tại tế bào điêu vong trung đích tác dụng, hữu trợ vu thâm nhập liễu giải tế bào điêu vong đích cơ chế dữ đối tật bệnh đích phòng trị.
Tế bào điêu vongMỹ quốc trứ danhSinh vậtThí tề công tưCLONTECHHòa Invitrogen công tư phân biệt khai phát liễu đa chủng tiêu ký đích Annexin V sản phẩm, giản tiện khoái tốc, 10 phân chung tựu khả hoàn thành kiểm trắc. Kỳ trung đái huỳnh quang tiêu ký đích Annexin V-EGFP ( Enhanced Green Fluorescent Protein ) cập Annexin V-FITC, linh mẫn độ cao, khả tác vi FACS ( lưu thức tế bào phân tuyển ) phương pháp si tuyển điêu vong tế bào đích cơ sở. Do vuDung hợp đản bạchAnnexin V-EGFP, EGFP dữ PS đích kết hợp bỉ lệ vi 1: 1, hoàn khả tiến hành định lượng kiểm trắc. Trừ thử chi ngoại, hoàn đề cung sinh vật tố ngẫu liên đích Annexin V, khả thông quá thường dụng đích môi liênHiển sắc phản ứngLai kiểm trắc. Lánh ngoại, MACS công tư tương từ châu bao bị Annexin V, khả thải dụng từ phân tuyển phương pháp si tuyển điêu vong tế bào.
2) tế bào nội dưỡng hóa hoàn nguyên trạng thái cải biến đích kiểm trắc:
Giá phản ứng liễu tế bào điêu vong nghiên cứu trung tương đối giác tân đích xu thế, nghiên cứu thập ma dạng đích dưỡng hóa hoàn nguyên hoàn cảnh dẫn khởi hạ du sự kiện đích phát sinh. CLONTECH công tư đích ApoAlertTMGlutathioneDetection Kit thông quáHuỳnh quang nhiễm liêumonochlorobimane( MCB ) thể ngoại kiểm trắc điêu vong tế bào tế bào chất trung cốc quang đại thái đích giảm thiếu lai kiểm trắc điêu vong tảo kỳ tế bào nội dưỡng hóa hoàn nguyên trạng thái đích biến hóa. Chính thường trạng thái hạ, cốc quang đại thái ( glutathione: GSH ) tác vi tế bào đích nhất chủng trọng yếu đíchDưỡng hóa hoàn nguyên hoãn trùng tề.Tế bào nội hữu độc đích dưỡng hóa vật thông quá bị GSH hoàn nguyên nhi định kỳ khứ trừ, dưỡng hóa hình đích GSH hựu khả bịGSHHoànNguyên môiTấn tốc hoàn nguyên. Giá nhất phản ứng tại tuyến lạp thể trung vưu vi trọng yếu, hứa đaHô hấp tác dụngTrung phó sản vật đích dưỡng hóa tổn thương tương do thử bị khứ trừ. Tại Jurcat hòa nhất ta kỳ tha loại hình đích tế bào trung, tế bào mô trung hữu khả bị điêu vong tín hào khải động đích ATP y lại đích GSH chuyển di hệ thống. Đương tế bào nội GSH đích bài trừ phi thường hoạt dược thời, tế bào dịch tựu doHoàn nguyên hoàn cảnhChuyển viDưỡng hóa hoàn cảnh,Giá khả năng đạo trí liễu điêu vong tảo kỳ tế bàoTuyến lạp thể môĐiện vị đích hàng đê, tòng nhi sửTế bào sắc tố C( tam thoa toan tuầnHoàn trungĐích trọng yếu tổ phân ) tòng tuyến lạp thể nội chuyển di đáo tế bào dịch trung, khải động điêu vong hiệu ứng khí caspase đíchCấp liên phản ứng.
Do vu GSH dữ dưỡng hóa hoàn nguyên tác dụng cập tuyến lạp thể công năng mật thiết tương quan, thử hạng kiểm trắc trừ liễu đối nghiên cứu tế bào điêu vong đích khởi thủy phi thường hữu dụng ngoại, hoàn khả dụng vuTâm tạngBệnh,Trung phongĐẳng tật bệnh trị liệu đích nghiên cứu. Đãn hữu ta tế bào như: HeLa hòa 3T3 tế bào điêu vong thời một hữu minh hiển đích GSH thủy bình đích biến hóa, bất năng dụng thử pháp kiểm trắc.
Tế bào sắc tố CTác vi nhất chủng tín hào vật chất, tại tế bào điêu vong trung phát huy trứ trọng yếu đích tác dụng. Chính thường tình huống hạ, tha tồn tại vu tuyến lạp thể nội mô hòa ngoại mô chi gian đích khang trung, điêu vong tín hào thứ kích sử kỳ tòng tuyến lạp thể thích phóng chí tế bào dịch, kết hợp Apaf-1 (apoptoticprotease activating factor-1 ) hậu khải độngcaspaseCấp liên phản ứng:Tế bào sắc tố C/Apaf-1 phục hợp vật kích hoạt caspase-9, hậu giả tái kích hoạt caspase-3 hòa kỳ tha hạ du caspase.Tế bào sắc tố C dưỡng hóa môiÁ đan vị Ⅳ ( cytochrome c oxidase subunit Ⅳ: COX4 ) thị định vị tại tuyến lạp thể nội mô thượng đíchMô đản bạch,Điêu vong phát sinh thời, tha bảo lưu tại tuyến lạp thể nội, nhân nhi tha thị tuyến lạp thể phú tập bộ phân đích nhất cá phi thường hữu dụng đích tiêu chí.
ApoAlertTMCell Fractionation Kit bất dụng siêu ly tâm, khả tòng điêu vong hòa phi điêu vong tế bào trung khoái tốc hữu hiệu phân ly xuất cao độ phú tập đích tuyến lạp thể bộ phân, tái tiến nhất bộ thông quáWestern tạp giaoDụngTế bào sắc tố CKháng thể hòa COX4 kháng thể tiêu kỳ tế bào sắc tố C hòa COX4 đích tồn tại vị trí, tòng nhi phán đoạn điêu vong đích phát sinh.
Tại điêu vong nghiên cứu đích tảo kỳ, tòngHình thái họcQuan trắc thượng tuyến lạp thể một hữu minh hiển đích biến hóa. Tùy trứ điêu vong cơ chế nghiên cứu đích thâm nhập, phát hiện tuyến lạp thể điêu vong dã thịTế bàoĐiêu vong đích trọng yếu tổ thành bộ phân, phát sinh ngận đaSinh lýSinh hóa biến hóa. Lệ như, tại thụ đáo điêu vong dụ đạo hậu tuyến lạp thể chuyển mô điện vị hội phát sinh biến hóa, đạo trí mô xuyên thấu tính đích cải biến.MitoSensorTM,Nhất cá dương ly tử tính đích nhiễm sắc tề, đối thử cải biến phi thường mẫn cảm, trình hiện xuất bất đồng đích huỳnh quang nhiễm sắc. Chính thường tế bào trung, tha tại tuyến lạp thể trung hình thànhTụ tập thể,Phát xuất cường liệt đích hồng sắc huỳnh quang. Điêu vong tế bào trung, nhân tuyến lạp thểXuyên mô điện vịĐích cải biến, tha dĩ đan thể hình thức tồn tại vuTế bào dịchTrung, phát xuất lục sắc huỳnh quang. Dụng huỳnh quangHiển vi kínhHoặcLưu thức tế bào nghiKhả thanh sở địa phân biện giá lưỡng chủng bất đồng đích huỳnh quang tín hào.CLONTECHCông tư đích ApoAlert Mitochondrial Membrane Sensor Kit tựu thải dụng giá chủng nguyên lý lai kiểm trắcTuyến lạp thể môĐiện vị đích biến hóa. Đãn thị, giá chủng phương pháp bất năng khu phân tế bào điêu vong hoặc kỳ tha nguyên nhân đạo trí đíchTuyến lạp thể môĐiện vị đích biến hóa.
Tế bào điêu vong vãn kỳ trung,Hạch toanNội thiết môi ( mỗ taCaspaseĐích để vật ) tại hạch tiểu thể chi gian tiễn thiết hạch DNA, sản sinh đại lượng trường độ tại 180-200 bp đích DNA phiến đoạn. Đối vu giá nhất hiện tượng đích kiểm trắc thông thường hữu dĩ hạ lưỡng chủng phương pháp:
Thông quá DNA mạt đoanChuyển di môiTương đái tiêu ký đích dNTP ( đa vi dUTP ) gian tiếp ( thông quáĐịa cao tân) hoặc trực tiếp tiếp đáo DNA phiến đoạn đích 3’-OH đoan, tái thông quá môi liên hiển sắc hoặc huỳnh quang kiểm trắc định lượng phân tích kết quả. Mỹ quốcIntergenCông tư đề cung đa chủng tiêu ký phương pháp, trực tiếp huỳnh quang tiêu ký, địa cao tân giới đạo huỳnh quang tiêu ký hoặcQuá dưỡng hóa vật môiLiên hiển sắc, khả tố tế bào huyền dịch,Phúc nhĩ mã lâmCố định hoặcThạch cháXử lý đích tổ chức,Tế bào bồi dưỡngVật đẳng đa chủng dạng bổn đích kiểm trắc. Kỳ trung, trực tiếp tiêu ký bộ sậu thiếu, thao tác giản tiện. Nhi gian tiếp tiêu ký hữuTín hào phóng đạiĐích tác dụng, kiểm trắc linh mẫn độ cao.
Đương điêu vong tế bào bỉ lệ giác tiểu dĩ cập kiểm trắc dạng phẩm lượng ngận thiếu ( như hoạt thể tổ chức thiết phiến ) thời, trực tiếpQuỳnh chi đườngĐiện vịnh khả năng quan sát bất đáo hạch DNA đích biến hóa.CLONTECHCông tư đích ApoAlert?LM-PCR Ladder Assay Kit thông quá LM-PCR ( ligation-mediated PCR ), liên thượng đặc dị tính tiếp đầu, chuyên nhất tính địa khoách tăng hạch tiểu thể đích thê độ phiến đoạn, tòng nhi linh mẫn địa kiểm trắc điêu vong thời sản sinh đích hạch tiểu thể đích thê độ phiến đoạn. Thử ngoại, LM-PCR kiểm trắc thị bán định lượng đích, nhân thử tương đồng điêu vong trình độ đích bất đồng dạng phẩm khả tiến hành bỉ giác.
Thượng thuật lưỡng chủng phương pháp đô châm đối tế bào điêu vong vãn kỳ hạch DNA đoạn liệt giá nhất đặc chinh, đãn tế bào thụ đáo kỳ tha tổn thương ( như cơ giới tổn thương, tử ngoại tuyến đẳng ) dã hội sản sinh giá nhất hiện tượng, nhân thử tha đối tế bào điêu vong đích kiểm trắc hội thụ đáo kỳ tha nguyên nhân đích càn nhiễu.
Giá thị tương đối lai thuyết thôi xuất giác tảo, dụng đắc giác đa đích nhất chủng phương pháp.Đoan lạpMôi thị do RNA hòa đản bạch tổ thành đích hạch đản bạch, tha khả dĩ tự thân RNA vi mô bảnNghịch chuyển lụcHợp thành đoan lạp khuTrọng phục tự liệt,Sử tế bào hoạch đắc “Vĩnh sinhHóa”. Chính thườngThể tế bàoThị một hữuĐoan lạpMôi hoạt tính đích, mỗi phân liệt nhất thứ,Nhiễm sắc thểĐích đoan lạp hội súc đoản, giá khả năng tác viHữu ti phân liệtĐích nhất chủng thời chung, biểu minh tế bào niên linh, phục chế suy lão hoặc tế bào điêu vong đích tín hào. Nghiên cứu phát hiện, 90% dĩ thượng đíchNham tế bàoHoặc điêu vong tế bào đô cụ hữu đoan lạp môi đích hoạt tính. Invitrogen công tư đích TRAP-eze Telemerase Detection Kit tại 1996 niên suất tiên thôi xuất. Tha đề cung đặc định đíchQuả hạch đại toanĐể vật,Phân biệt dữ để vật cậpĐoan lạpTrọng phục tự liệtPhối đối đích dẫn vật. Như quả đãi trắc dạng bổn trung hàm hữuĐoan lạpMôi hoạt tính, tựu năng tạiĐể vậtThượng tiếp thượng bất đồng cá sổ đích 6 dảm cơ ( GGTTAG ) đoan lạp trọng phục tự liệt, thông quá PCR phản ứng, sản vật điện vịnh kiểm trắc tựu khả quan sát đáo tương soa lục cá dảm cơ đích DNA Ladder hiện tượng ( tham kiến đồ 4 ). Thử ngoại, Intergen công tư hoàn đề cung dụngMôi liên miễn dịch pháp( ELISA ) kiểm trắc đíchThí tề hạp.
Đồng dạng, giá chủng kiểm trắc phương pháp dã bất chuyên đối tế bào điêu vong, kiểm trắc kết quả dã bất thuần phản ứng tế bào điêu vong đích phát sinh.
Nghiên cứu giả môn phát hiện liễu ngận đa tạiTế bào điêu vongThời biểu đạt dị thường đích cơ nhân, kiểm trắc giá ta đặc dị cơ nhân đích biểu đạt thủy bình dã thành vi kiểm trắcTế bàoĐiêu vong đích nhất chủng thường dụng phương pháp. Cư báo đạo, FasĐản bạch kết hợpThụ thể hậu năng dụ đạo nham tế bào trung đíchTế bào độc tính T tế bào( cytotoxic T cells ) đẳng bá tế bào. Bcl-2 hòa bcl-X ( trường ) tác vi kháng điêu vong ( bcl-2 hòa bcl-X ) đíchĐiều tiết vật,Tha môn đích biểu đạt thủy bình bỉ lệ quyết định liễu tế bào thị điêu vong hoàn thị tồn hoạt. Nhất bàn đa thải dụng Northern tạp giao hòaRT-PCRTẩu giao đối tha môn tiến hành kiểm trắc. Tùy trứHuỳnh quang định lượng PCRKỹ thuật đích phát triển, dụng định lượng PCR kỹ thuật lai kiểm trắc cơ nhân biểu đạt thủy bình vô nghi bỉ chi tiền giả canh khoái canh chuẩn xác. Invitrogen công tư đích Amplifluor Apoptosis Gene Systems tựu căn cư giá nhất tân kỹ thuật nguyên lý, thông quá kiểm trắc fas,bax-alpha hòa bcl-X ( trường đích ) cơ nhân đích mRNA biểu đạt thủy bình lai tiến hành tế bào điêu vong đích kiểm trắc.
Tế bào điêu vong đích hình thái học kiểm trắc1． quang học hiển vi kính hòa đảo trí hiển vi kính
1． vị nhiễm sắc tế bào: Điêu vong tế bào đích thể tích biến tiểu, biến hình,Tế bào môHoàn chỉnh đãn xuất hiện phát phao hiện tượng, tế bào điêu vong vãn kỳ khả kiếnĐiêu vong tiểu thể.
Thiếp bích tế bào xuất hiện trứu súc, biến viên, thoát lạc.
2． nhiễm sắc tế bào: Thường dụngCơ mỗ tát nhiễm sắc,Thụy thị nhiễm sắc đẳng. Điêu vong tế bào đíchNhiễm sắc chấtNùng súc, biên duyên hóa, hạch mô liệt giải, nhiễm sắc chất phân cát
Nhất bàn dĩ tế bào hạch nhiễm sắc chất đích hình thái học cải biến vi chỉ tiêu lai bình phán tế bào điêu vong đích tiến triển tình huống.
Thường dụng đích DNA đặc dị tính nhiễm liêu hữu: HO 33342 (Hoechst 33342 ), HO 33258 (Hoechst 33258),DAPI. Tam chủng nhiễm liêu dữ DNA đích kết hợp thị phi khảm nhập thức đích, chủ yếu kết hợp tại DNA đích A-T dảm cơ khu. Tử ngoại quang kích phát thời phát xạ minh lượng đích lam sắc huỳnh quang.
Hoechst thị dữ DNA đặc dị kết hợp đích hoạt tính nhiễm liêu, trữ tồn dịch dụng chưng lựu thủy phối thành 1mg/ml đích nùng độ, sử dụng thời dụng PBS hi thích thành chung nùng độ vi 2~5mg/ml.
DAPI vi bán thông thấu tính, dụng vu thường quy cố định tế bào đích nhiễm sắc. Trữ tồn dịch dụng chưng lựu thủy phối thành 1mg/ml đích nùng độ, sử dụng chung nùng độ nhất bàn vi 0.5 ~1mg/ml.
Kết quả bình phán: Tế bào điêu vong quá trình trung tế bào hạch nhiễm sắc chất đích hình thái học cải biến phân vi tam kỳ: Ⅰ kỳ đích tế bào hạch trình ba văn trạng ( rippled ) hoặc trình chiết phùng dạng ( creased ), bộ phân nhiễm sắc chất xuất hiện nùng súc trạng thái; Ⅱa kỳ tế bào hạch đích nhiễm sắc chất cao độ ngưng tụ, biên duyên hóa; Ⅱb kỳ đích tế bào hạch liệt giải vi toái khối, sản sinhĐiêu vong tiểu thể.
3． thấu xạ điện tử hiển vi kính quan sát
Kết quả bình phán: Điêu vong tế bào thể tích biến tiểu, tế bào chất nùng súc. Điêu vong Ⅰ kỳ ( pro-apoptosis nuclei ) đích tế bào hạch nội nhiễm sắc chất cao độ bàn nhiễu, xuất hiện hứa đa xưng viKhí huyệt hiện tượng( cavitations ) đích không phao kết cấu; Ⅱa kỳ tế bào hạch đích nhiễm sắc chất cao độ ngưng tụ, biên duyên hóa; tế bào điêu vong đích vãn kỳ, tế bào hạch liệt giải vi toái khối, sản sinhĐiêu vong tiểu thể.
Tế bào điêu vong tại phôi thai phát dục, tạo huyết, miễn dịch hệ thống đích thành thục dĩ cập duy hộ chính thường tổ chức hòa khí quan đích tế bào hằng định dữ sinh trường bình hành, nãi chí cơ thể suy lão phương diện đô khởi trứ trọng yếu tác dụng. Nhân thử, hữu quan điêu vong đích nghiên cứu tại lâm sàng hòa cơ sở đẳng các cá lĩnh vực dĩ kinh quảng phiếm khai triển, điêu vong tế bào đích kiểm trắc phương pháp hiển đắc phi thường trọng yếu. Lưu thức tế bào nghi ( Flow cytometry,FCM) tương lưu thể phún xạ kỹ thuật, kích quang quang học kỹ thuật, điện tử kỹ thuật hòa kế toán cơ kỹ thuật đẳng tập vu nhất thể, giác kỳ tha phương pháp hữu bất khả bỉ nghĩ đích ưu việt tính, kí khả định tính hựu khả định lượng, thả cụ hữu giản đan, khoái tốc hòa mẫn cảm tính cao đích đặc điểm, khả tiến hành đa tham sổ hòa hoạt thể tế bào phân tích. Tại APO đích nghiên cứu đắc đáo giác vi quảng phiếm đích ứng dụng, khai tích liễu tân đồ kính.
1 quang tán xạ pháp
Tại FCM hệ thống trung, bị kiểm tế bào tại dịch lưu trung thông quá nghi khí trắc lượng khu thời, kinh kích quang chiếu xạ, tế bào hướng không gian 360° lập thể giác đích sở hữu phương hướng tán xạ quang tuyến, kỳ trung tiền hướng tán xạ quang ( FSC) đích cường độ dữ tế bào đại tiểu hữu quan, nhi trắc hướng tán xạ quang (SSC) đích cường độ dữ chất mô hòa tế bào nội bộ đích chiết xạ suất hữu quan. Tế bào điêu vong thời, tế bào cố súc, thể tích biến tiểu, hạch toái liệt hình thành, tế bào nội khỏa lạp vãng vãng tăng đa, cố điêu vong tế bào FSC hàng đê nhi SSC tăng cao. Tế bào phôi tử do vu bào thể thũng trướng, tế bào hạch diệc toái liệt phân giải cố FSC hòa SCC quân tăng cao. Chính thường tế bào FSC cao nhi SSC đê. Căn cư quang tán xạ đặc tính kiểm trắc điêu vong tế bào tối chủ yếu đích ưu điểm thị khả dĩ tương quang tán xạ đặc tính dữ tế bào biểu diện miễn dịch huỳnh quang phân tích kết hợp khởi lai, dụng dĩ khu biệt biện nhận kinh giá ta đặc thù xử lý phát sinh tuyển trạch điêu vong đích lâm ba tế bào á hình, dã khả dụng vu hoạt tế bào phân loại. Trị đắc chú ý đích thị, căn cư FSC hòa SSC phán đoạn điêu vong tế bào đích khả kháo tính thụ bị trắc tế bào hình thái thượng đích quân nhất tính hòa hạch tế bào tương bỉ suất ảnh hưởng ngận đại, nhân thử tại mỗ ta lâm ba tế bào điêu vong trung, dụng quang tán xạ đặc tính kiểm trắc điêu vong đích khả kháo tính giác hảo nhi tại thũng lựu tế bào điêu vong trung kỳ khả kháo tính giác soa.
2 tế bào DNA hàm lượng đích trắc định
Tế bào điêu vong thời, hạch toan nội thiết môi kích hoạt, đạo trí DNA đoạn liệt, giá thị điêu vong đích đặc chinh tính biểu hiện, dã vi FCM giám biệt điêu vong tế bào điện định liễu cơ sở. Nhi kiểm trắc tế bào điêu vong DNA đoạn liệt đích phương pháp trung, tối thường dụng, tối giản tiện đích tựu thị tế bào DNA hàm lượng phân tích. Đương tế bào dụng ất thuần, TrtionX—100 xử lý hậu tế bào mô thượng xuất hiện lậu động, tiểu phiến đoạn DNA tòng tế bào nội thích phóng xuất lai, sử kỳ DNA hàm lượng đê vu chính thường tế bào đích nhị bội thể. Dụng điển hóa bính định ( PI) nhiễm sắc hậu phân tích, khả tại nhị bội thể C0/ G1, phong tiền xuất hiện “Á nhị bội thể” phong, tức tế bào điêu vong phong (APO phong ), căn cư APO phong khả trắc xuất điêu vong tế bào bách phân suất, cai pháp giản đan dịch hành, khả đại phê định lượng kiểm trắc điêu vong tiêu bổn, diệc khả đồng thời phân tích tế bào đích tế bào chu kỳ vị trí. Lánh ngoại, ứng dụng FCM phương pháp thông quá đối DNA hòa RNA đích liên hợp kiểm trắc khả dĩ giám biệt xuất G0 kỳ tế bào, nhân thử, khả phân tích tế bào điêu vong dữ G1 hoặc G0 tế hung đích quan hệ. DNA hàng giải đích trình độ thủ quyết vu điêu vong đích giai đoạn, tế bào đích loại hình hòa điêu vong dụ phát nhân tử đích đặc tính. Nhiễm sắc quá trình trung DNA đích dật xuất lượng biến hóa dã ảnh hưởng FCM kiểm trắc kết quả. Cư nghiên cứu, tương cao nùng độ đích lân toan diêm ——— cẩu chuyên toan diêm hoãn trùng dịch gia nhập phiêu tẩy dịch trung, khả tăng cao hàng giải DNA đích dật xuất lượng, tòng nhi đề cao giám biệt điêu vong tế bào dữ chính thường tế bào đích năng lực.
DNA hàm lượng trắc định tại kiểm trắc tế bào điêu vong trung đích cục hạn tính tại vu kỳ đặc dị tính hòa mẫn cảm tính quân bất cao. Đặc dị tính bất cao thị nhân vi APO phong đại biểu liễu nhất tổ tế bào quần thể, bao quát điêu vong tế bào, cơ giới tổn thương tế bào, đê DNA hàm lượng đích tế bào hoặc bất đồng nhiễm sắc thể kết cấu đích tế bào, tại thượng thuật tình huống hạ,DNA dữ huỳnh quang nhiễm liêu đích kết hợp lượng quân tiểu. Lánh ngoại, phi cố định đích tế bào tại đê sấm dung dịch trung bị dung giải thời, khả đạo trí đại lượng đích hạch toái phiến xuất hiện, thử thời APO phong đích tế bào sổ mục chỉ đại biểu liễu hạch toái phiến đích sổ mục, tịnh bất đại biểu điêu vong tế bào sổ mục. Mẫn cảm tính giác soa đích nguyên nhân thị tế bào điêu vong tảo kỳ chỉ hữu DNA đoạn liệt điểm xuất hiện, đãn thượng vị xuất hiện DNA phiến đoạn đích đại lượng đâu thất, sở dĩ cai pháp bất năng kiểm xuất tảo kỳ điêu vong tế bào hòa phát sinh vu S kỳ hoặc G2/ M kỳ đích điêu vong tế bào, nhân vi kỳ thật tế hàm lượng bất đê vu nhị bội thể tế bào sở hàm đích DNA, nhân thử cai pháp tiến hành điêu vong tế bào phân tích thời ứng kết hợp kỳ tha hình thái hoặc sinh hóa phương pháp, dĩ kỳ canh chuẩn xác địa phân tích tế bào đích điêu vong trạng thái.
3 Y định chanh nhiễm sắc pháp ( Acridine Orange,AO)
AO khả tương tế bào hoặc tế bào hạch trung đích song liên DNA hòa biến tính DNA nhiễm thành bất đồng nhan sắc đích huỳnh quang. AO sáp nhập song liên DNA trung thời, phát lục sắc huỳnh quang;AO dã khả dữ đan liên hoặc thông quá biến tính nhi sản sinh đích DNA đan liên phát sinh tác dụng, giá thời phát xuất hồng sắc huỳnh quang, nhân thử, thông quá FCM kiểm trắc bất đồng đích huỳnh quang, khả phán đoạn điêu vong đích phát sinh. Tại trắc định bị tiêu chuẩn hóa hậu, lục sắc hòa hồng sắc huỳnh quang cường độ đích lượng dữ tổng DNA hàm lượng thành bỉ lệ, hồng sắc huỳnh quang dữ tổng thể tế bào ( hồng sắc gia lục sắc ) huỳnh quang đích bỉ suất biểu kỳ tế bào trung biến tính DNA đích bỉ lệ, nhân thử, giá chủng phương pháp khả dụng vu bình giới DNA đối nguyên vị biến tính đích mẫn cảm tính. Hữu thời hầu, điêu vong tế bào DNA hàng giải bất minh hiển, y lại vu DNA hàng giải lai kiểm trắc tế bào điêu vong đích phương pháp như tế bào DNA hàm lượng trắc định, DNA mạt đoan tiêu ký đẳng tựu nan dĩ kiểm trắc đáo tế bào điêu vong biến hóa. AO pháp kiểm trắc điêu vong đích nguyên lý bất y lại vu DNA phiến đoạn đích sản sinh, nhân thử kỳ tối chủ yếu đích ưu điểm thị khả ứng dụng vu quả hạch tiểu thể phiến đoạn dữ điêu vong bất tương bình hành đẳng tình huống, đãn AO nhiễm sắc pháp bất năng hữu hiệu khu phân hữu ti phân liệt tế bào hòa điêu vong tế bào.
4 nhược đan minh ( Rh123) nhiễm sắc pháp
Tế bào sinh hoạt trạng thái hạ, bào mô thượng đích nột - giáp bơm, cái bơm đẳng đích tác dụng, sử tế bào mô nội ngoại duy trì trứ bất đồng ly tử đích nùng độ thê độ, bao quát Na +, K+,Cl -,Ca2 + đẳng, hình thành tế bào mô điện vị. FCM khả dĩ kiểm trắc thân chi tính ly tử huỳnh quang nhiễm liêu tại bào mô nội ngoại đích phân bố, lai trắc lượng mô điện vị đích cao đê, dĩ bình giới tế bào đích hoạt lực. Rh123 thị nhất chủng thân chi tính dương ly tử huỳnh quang nhiễm liêu, đối tế bào mô cụ hữu thông thấu tính, tuyến lạp thể mô vưu mẫn cảm. Tế bào tồn hoạt trạng thái thời, nhược đan minh 123 thông quá tế bào mô, tích tụ vu tuyến lạp thể phát xuất lục sắc huỳnh quang. Tại tế bào điêu vong thời, tuyến lạp thể mô đích chuyển vận năng lực hạ hàng, điện phụ tính hàng đê, cố tế bào tuyến lạp thể tích tụ Rh123 đích năng lực dã tang thất, huỳnh quang cường độ hàng đê, cư thử kiểm trắc tế bào đích điêu vong biến hóa. Đãn ứng chỉ xuất, tại điêu vong đích tảo kỳ giai đoạn, do vu bào mô thượng hoàn chỉnh, đại đa sổ tế bào khí hòa tế bào công năng tương đối giác hảo, nhân thử,Rh123 pháp đối vu tảo kỳ điêu vong tế bào hòa hoạt tế bào đích giám biệt bỉ giác khốn nan.
5 nguyên vị mạt đoan tiêu ký kỹ thuật
Tế bào điêu vong thời,DNA đoạn liệt tảo vu hình thái học cải biến cập DNA hàm lượng giảm thiếu, nguyên vị mạt đoan tiêu ký ( ISEL) thị tương sấm nhập đáo điêu vong tế bào trung đích ngoại nguyên tính hạch đại toan tại môi hòa DNA đích thôi hóa hạ dữ điêu vong tế bào nhân nội nguyên tính hạch toan môi đích kích hoạt nhi sản sinh đích đan cổ hoặc song cổ đoạn liệt tương kết hợp, giác tiền thuật phương diện cụ canh cao linh mẫn tính. Thông thường hữu lưỡng chủng phương pháp: ①DNA tụ hợp môi I hoặc klenow đại phiến đoạn giới đạo đích đan vị khuyết khẩu bình di ( INST); ② mạt đoan thoát dưỡng hạch đại toan chuyển di môi giới đạo đích dUTP khuyết khẩu mạt đoan tiêu ký ( TUNEL).
INST thị lợi dụng DNA đa tụ môi tương hạch đại toan chỉnh hợp đáo điêu vong tế bào nội đoạn liệt đích DNA xử đích 3’ mạt đoan, đồng thời thủy giải 5’ mạt đoan, dĩ tu phục DNA, nhược sử dụng dĩ tiêu ký đích hạch đại toan tức khả hiển kỳ xuất hữu đoạn liệt DNA đích tế bào. 1993 niên,Gorczyca đẳng đề xuất liễu mạt đoan thoát dưỡng hạch đường hạch toan chuyển di môi ( TdT) tiêu ký pháp thải kiểm trắc điêu vong tế bào đích DNA đoạn liệt, thử chủng phương pháp dĩ đắc đáo quảng phiếm ứng dụng. Do vu nội nguyên tính hạch toan nội thiết môi kích hoạt, tế bào tự thân đích nhiễm sắc chất hoặc DNA bị thiết cát, tịnh sản sinh dữ DNA đoạn điểm sổ mục tương đồng đích 3’2 thưởng cơ mạt đoan, TdT khả dĩ tương sinh vật tố hóa đích dUTP tiêu ký chí 3’2 thưởng cơ mạt đoan, thông quá noãn bạch tố 2FITC hệ thống, sử DNA đích đoạn điểm bộ vị phát sinh đặc dị huỳnh quang nhi thiêm biệt xuất điêu vong tế bào,TdT mạt đoan tiêu ký pháp thị giám biệt điêu vong tế bào bỉ giác đặc dị đích nhất chủng phương pháp. Não tổ chức trung đích điêu vong tế bào ngận thiếu, nhân thử cơ nhân tổ DNA phiến đoạn nhu yếu canh linh mẫn đích kiểm trắc kỹ thuật. Tương TUNEL pháp dữ FCM kết hợp khởi lai khả dĩ đề cao kiểm trắc điêu vong tế bào trung DNA phiến đoạn đích linh mẫn độ. Kinh điêu vong dụ đạo nhân tử xử lý nhất định thời gian hậu đích tế bào, nguyên vị mạt đoan tiêu ký đích điêu vong bỉ Hoechst33342 nhiễm sắc hiển kỳ đích yếu đa, đề kỳ TUNEL khả kiểm trắc xuất thượng vị xuất hiện minh hiển điêu vong hình thái học đặc chinh đãn dĩ phát sinh DNA liệt giải đích hạch, tòng nhi sử kiểm trắc đích linh mẫn độ đề cao. Đối bỉ nghiên cứu biểu minh, TUNEL đích mẫn cảm tính viễn viễn cao vu ISNT, vưu kỳ tại APO tảo kỳ TUNEL pháp dương tính suất giác cao, khả năng thị APO phát sinh thời DNA đa sổ vi song liên đồng thời đoạn liệt, đan liên thiếu kiến đích nguyên nhân. Hậu giả thị y lại DNA đa tụ môi giới đạo đích tu phục phản ứng, cố ISNT đích dương tính suất tương đối giác đê. TUNEL hoàn khả kết hợp tế bào đồng kỳ đích phân tích, khả đồng thời liễu giải điêu vong tế bào DNA đoạn liệt hòa tế bào chu kỳ phân bố chi gian đích quan hệ, cận lai dĩ thành vi giám biệt hòa định lượng điêu vong tế bào đích tối thường dụng phương pháp chi nhất. Đãn do vu đoạn liệt DNA đích tiêu ký quá trình bỉ giác phục tạp, thiệp cập đa chủng nhân tố, sở dĩ mạt đoan tiêu ký đích âm tính kết quả tịnh bất nhất định đại biểu DNA liên đích hoàn chỉnh, ứng bài trừ phương pháp thượng đích vấn đề, như TdT môi hoạt lực đích tang thất đẳng chư đa ảnh hưởng nhân tố. Nhân thử ứng dụng TdT mạt đoan tiêu ký pháp giám biệt điêu vong tế bào tất tu đồng thời thiết dương tính cập âm tính đối chiếu tổ, dĩ tiện đắc đáo khả kháo kết quả.
6 Annexin V/ PI pháp
1992 niên Fadok báo đạo tại APO tảo kỳ vị vu tế bào mô nội trắc đích lân chi tiên ti an toan (phosphatidylserin,PS) thiên di chí tế bào ngoại trắc, giá nhất hiện tượng xuất hiện tại hạch nhiễm sắc chất biến tính dữ hạch thể tích súc tiểu chi tiền. AnnexinV thị nhất chủng cụ hữu ngận cường đích kháng ngưng huyết đặc tính đích huyết quản đản bạch, hòa lân chi hữu cao thân hợp lực, vưu kỳ dữ đái phụ điện hà đích lân chi như PS cụ cực cường đích kết hợp lực, lợi dụng kỳ đặc tính khả dĩ kiểm trắc tế bào điêu vong. Đãn phôi tử tế bào PS diệc bạo lộ vu ngoại biểu sử Annexin V kết hợp dương tính, nhân thử sử dụng Annexin V giá nhất tham sổ bất năng khu phân phôi tử hoặc điêu vong, tất tu đồng thời thải dụng PI giá nhất tham sổ tương phôi tử tế đảm khu phân khai lai. FCM thông quá Annexin V —FITC tiêu chí bạo lộ vu tế bào mô thượng đích PS kết hợp PI tiến nhập tổn thương tế bào mô tiêu ký hàng giải DNA phân tích điêu vong dữ phôi tử tế bào. Tại kiểm trắc thời hữu 4 cá á quần bao quát cơ giới tính tổn thương tế bào (Annexin - / P1 + ), chính thường tế bào (An2nexin - / PI - ), điêu vong tế bào (Annexin + / PI - ) hòa kế phát tính phôi tử tế bào (Annexin + / PI + ) bị khu phân. Boersma đẳng ứng dụng Ampexin V2FITE nhiễm sắc pháp kiểm trắc tế bào độc dược vật xử lý hậu đích trung quốc thương thử tế bào điêu vong biến hóa,FCM kiểm trắc phát hiện huỳnh quang tín hào cường nhược bất đồng đích lưỡng chủng tế bào á quần. Tiến nhất bộ hình thái học đẳng chứng thật nhược huỳnh quang tế bào á quần đại biểu tảo kỳ điêu vong tế bào, cường huỳnh quang á quần đại biểu vãn kỳ điêu vong tế bào, khả kiến kỳ thị kiểm trắc hòa định lượng điêu vong tế bào đích nhất chủng giác vi khả kháo đích phương pháp. Tế bào điêu vong thời mô thượng PS ngoại lộ tảo vu DNA đoạn liệt phát sinh, nhân thử cai pháp kiểm trắc tảo kỳ điêu vong canh vi linh mẫn, thả cai pháp bất nhu yếu cố định tế bào, tị miễn liễu PI pháp nhân cố định tạo thành đích tế bào toái phiến quá đa cập TUNEL pháp nhân cố định xuất hiện đích DNA phiến đoạn đâu thất, nhân thử canh gia tỉnh thời, kết quả diệc canh khả kháo, thị mục tiền tối vi lý tưởng đích điêu vong định lượng kiểm trắc phương pháp.
7 kỳ tha
7.1 ssDNA đan kháng pháp bả kháng đan liên DNA(ssDNA) đan khắc long kháng thể dụng vu tế bào điêu vong đích kiểm trắc, thị nhất chủng ngẫu nhiên phát hiện, nhân vi tại ứng dụng ssDNA đan kháng ( huỳnh quang pháp ) kiểm trắc tế bào độc tính dược vật dụ đạo DNA tổn thương trung, quan sát đáo điêu vong đích bạch huyết bệnh tế bào (MOL T24) hữu giác cường đích huỳnh quang, hậu lai kinh quá thích đương đích cải tiến, chứng minh ssDNA đan kháng khả dĩ đặc dị địa thức biệt điêu vong tế bào. Dữ TUNEL pháp tương bỉ,ssDNA cụ hữu canh cường đích linh mẫn tính. TUNEL pháp kiểm trắc đích điêu vong tế bào khả năng chỉ thị đan kháng pháp kiểm trắc đích điêu vong tế bào trung đích nhất cá á loại. ssDNA pháp kiểm trắc APO nhất bàn dụng miễn dịch huỳnh quang pháp. Đãn dã khả hòa FCM kết hợp ứng dụng. Đan kháng pháp sử dụng giản tiện, thành bổn đê, ứng dụng quảng phiếm. ssDNA đan kháng khả dĩ khu biệt phôi tử hòa điêu vong, thậm chí năng kiểm trắc tiền kỳ điêu vong, điêu vong hậu phôi vong hòa nhất ta đặc thù đích điêu vong hình thức ( như vô phiến đoạn hóa đích tế bào điêu vong ). Nhân thử, ssDNA đan kháng pháp khả vọng thành vi nhất chủng tân đích đặc dị linh mẫn kiểm trắc tế bào điêu vong đích phương pháp.
7.2 tế bào điêu vong đích tương quan đản bạch phân tích nghiên cứu phát hiện, hữu bất thiếu cơ nhân tham gia điêu vong điều khống, giá ta cơ nhân sản vật khả tham dữ xúc tiến hoặc ức chế APO đích phát sinh, phát triển, nhân thử kiểm trắc điêu vong điều tiết cơ nhân đản bạch đối nghiên cứu APO cập kỳ điều khống hữu trọng yếu tác dụng. Hất kim vi chỉ, dĩ khả đối đại lượng tế bào điêu vong điều tiết cơ nhân đích đản bạch sản vật phân tích, như P35 đản bạch, caspases, C2myc, Fas kháng nguyên, TNF, bcl22 gia tộc đản bạch, cyclin, ras đẳng. FCM dụng huỳnh quang tiêu ký đích các chủng điều khống đản bạch đan kháng nhiễm sắc, thu tập bất đồng ba trường đích huỳnh quang tín hào, kiểm trắc tế bào mô biểu diện hoặc tế bào nội huỳnh quang phân tử sổ lượng, khả dĩ liễu giải mỗi cá tế bào đích biến hóa, nhi thả sở nhu dạng phẩm thiếu, phương pháp giản tiện, khoái tiệp, chuẩn xác.
8 triển vọng
Cận kỉ niên lai, tùy trứ FCM kỹ thuật đích bất đoạn phát triển hòa APO nghiên cứu đích trục tiệm thâm nhập,FCM tại tế bào điêu vong nghiên cứu trung nhật ích quảng phiếm. Ứng dụng FCM định lượng kiểm trắc điêu vong tế bào giản tiện, khoái tốc, khách quan, tịnh khả tiến hành đa tham sổ kiểm trắc, nhân thử, khả đồng thời đối APO cập kỳ tương quan đích nham cơ nhân biểu đạt, tế bào chu kỳ phân bố đẳng chư đa nhân tố tiến hành tương quan phân tích, khả dĩ bỉ giác thâm nhập địa liễu giải điêu vong đích điều tiết cơ chế. Tẫn quản ứng dụng FCM tiến hành tế bào điêu vong nghiên cứu đích phương pháp giác đa, đãn FCM kiểm trắc điêu vong tế bào đích phương pháp nhất bàn cơ vu tế bào điêu vong quá trình trung hình thái, sinh hóa đẳng mỗ nhất phương diện đích đặc tính, nhân nhi nan vu liễu giải điêu vong quá trình trung phát sinh đích các chủng biến hóa đích tương hỗ quan hệ, dã sử cai loại phương pháp khuyết phạp đặc dị tính, sở dĩ, liên hợp ứng dụng đa chủng châm đối bất đồng đặc tính đích FCM kiểm trắc phương pháp, tài năng canh vi hữu hiệu địa giám biệt điêu vong tế bào. Đồng thời,FCM nghiên cứu kết quả thượng nhu đồng thời kết hợp hình thái học quan sát hoặc sinh vật hóa học phương pháp, tài năng canh gia thâm nhập địa liễu giải điêu vong tế bào đích sinh vật học đặc tính. Tùy trứ sinh vật kỹ thuật đích phát triển cập nhân môn đối APO bổn chất nhận thức đích thâm nhập, tương tín tại bất cửu đích tương lai, định hội hữu canh vi đặc dị hòa mẫn cảm đích phương pháp vấn thế, hữu trợ vu tế bào điêu vong thủ đắc đột phá tính tiến triển.
Tế bào điêu vongHòaTế bàoTăng thực đô thị sinh mệnh đích cơ bổn hiện tượng, thị duy trì thể nội tế bào sổ lượng động thái bình hành đích cơ bổn thố thi. TạiPhôi thaiPhát dục giai đoạnThông quá tế bào điêu vong thanh trừ đa dư đích hòa dĩ hoàn thành sử mệnh đích tế bào, bảo chứng liễu phôi thai đích chính thường phát dục; tại thành niên giai đoạn thông quá tế bào điêu vong thanh trừ suy lão hòa bệnh biến đích tế bào, bảo chứng liễuCơ thểĐích kiện khang. HòaTế bào tăng thựcNhất dạng tế bào điêu vong dã thị thụCơ nhânĐiều khống đích tinh xác quá trình.
