Miễn dịch tế bào hóa học pháp
Đem miễn dịch học cơ bản nguyên lý cùng tế bào hóa học kỹ thuật tương kết hợp sở thành lập lên tân kỹ thuật
Miễn dịch tế bào hóa học là đem miễn dịch học cơ bản nguyên lý cùngTế bào hóa học kỹ thuậtTương kết hợp sở thành lập lên tân kỹ thuật, căn cứ kháng nguyên cùng kháng thể đặc dị tính kết hợp đặc điểm, kiểm tra đo lường tế bào nội nào đó nhiều thái, protein cập màng mặt ngoài kháng nguyên cùng chịu thể chờĐại phần tử vật chấtTồn tại cùng phân bố.
- Tiếng Trung danh
- Miễn dịch tế bào hóa học
- Ngoại văn danh
- immunocytochemistry
- Giải thích
- Miễn dịch học nguyên lý cùng tế bào hóa học kỹ thuật kết hợp
- Thuộc tính
- Một loại tân kỹ thuật
- Phân loại
- Trực tiếp pháp, gián tiếp pháp
- Đua âm
- miǎn yì xì bāo huà xué
Mục lục
Thái loại cùng protein chủng loại phồn đa, đều có kháng nguyên tính, đương đem người hoặc động vật bạch bái hồng hồng mỗ giảng thiêm ảnh loại thái hoặc protein làm kháng nguyên rót vào một loại khác động vật trong cơ thể, tắc sinh ra cùng nên kháng nguyên tương ứng đặc dị tính kháng thể (Miễn dịch cầu lòng trắng trứng); đem kháng thể từ huyết thanh trung đưa ra sau, kết hợp thượng nào đó đánh dấu vật, tức trở thành đánh dấu kháng thể. Người dùng biện bó đánh dấu kháng thể cùng tổ chức cắt miếng tiêu bản ấp trứng, kháng thể tắc cùng tế bào trung tương ứng kháng nguyên phát sinh đặc dị tính kết hợp, kết hợp bộ vị bị đánh dấu vật biểu hiện, thì tại kính hiển vi hạ quan sát đến nên thái hoặc protein phân bố. Dùng ánh huỳnh quang tố ( thường dùng dị lưu xyanogen toan ) đánh dấu kháng thể, cũng vớiÁnh huỳnh quang kính hiển viHạ quan sát, chỉnh cát xưng miễn dịch ánh huỳnh quang thuật tổ lừa. Thiết bảo lại như kháng thể cùngCay căn peroxy hóa vật môi( horse radish peroxidase, HRP phủ nguy chân ) chờ kết hợp, tiến hành môi biểu hiện sau, nhưng ở quang kính hoặc điện kính quan sát, dùng cho điện kính giả tắc van tuần muội xưng là miễn dịch điện kính thuật ( immunoelectronmicroscopy ) ngoài ra, lấy thiết trứng đánh dấu kháng thể bạch đánh dấu kháng thể, xưng thiết lòng trắng trứng đánh dấu pháp, cũng có thể dùng cho điện kính hạ quan sát.
① trực tiếp pháp: Dùng đánh dấu kháng thể cùng kháng thể trung tương ứng kháng nguyên trực tiếp kết hợp, thao tác phương pháp giản tiện, đặc dị tính cao, nhưng mẫn cảm tính tương đối kém, này pháp nhưng dùng cho kiểm định không biết kháng nguyên; ② gián tiếp pháp: Trước dùng chưa đánh dấu có đặc dị tính đệ nhất kháng thể cùng hàng mẫu trung tương ứng kháng nguyên kết hợp, sau đó lại lấy đánh dấu đệ nhị kháng thể cùng đặc dị tính đệ nhất kháng thể kết hợp; đệ nhị kháng thể là dùng đệ nhất kháng thể làm kháng nguyên rót vào một khác động vật trong cơ thể hướng dẫn sinh ra kháng thể, sau đó lại kết hợp lấy đánh dấu vật. Thông qua như vậy phóng đại tác dụng, sử kháng nguyên phần tử thượng đánh dấu vật đại đại tăng nhiều, cố gián tiếp pháp so trực tiếp pháp mẫn cảm tính rất là tăng cao, ước cao 5～10 lần, cố ứng dụng càng vì rộng khắp. Gián tiếp pháp trung so thường dùng, như peroxy hóa vật môi - kháng peroxy hóa vật môi hợp chất pháp (peroxidase anti-peroxidase complexmethod, đánh dấu phương pháp PAP pháp ), nên pháp trừ cần một kháng cùng nhị kháng ngoại, còn cần chế bị HRP đánh dấu kháng môi kháng thể, tức lấy HRP làm kháng nguyên miễn dịch động vật, chế thành kháng HRP kháng thể, lại lấy HRP đối đánh dấu nên kháng thể, chế thành ổn định vòng tròn PAP hợp chất. Tiêu bản trước sau kinh một kháng, nhị kháng cùng PAP hợp chất xử lý sau lại lấy DAB hiện sắc kháng nguyên tồn tại bộ vị có thể thấy được nâu nhạt sắc sản vật. Miễn dịch tế bào học kỹ thuật có rất lớn tiến triển, các loại tân phương pháp lần lượt thành lập. Đơn clone kháng thể ( monoclonal antibody ) chế bị kỹ thuật cực đại mà đề cao kháng thể đặc dị tính cùng miễn dịch tổ hóa nhuộm màu chính xác tính. Kế PAP pháp lúc sau bởi vì sinh vật tố - thân hợp tố chờ thuốc thử ứng dụng, vì kiểm tra đo lường vi lượng kháng nguyên, chịu thể, kháng thể cung cấp càng chính xác kỹ thuật.
Thân hợp phương pháp có: Đánh dấu thân hợp tố - sinh vật tố pháp (labelled avidin-biotin method LAB pháp ), kiều liền thân hợp tố - sinh vật tố pháp ( bridged avidin-biotin method, BAB pháp ) cập thân tố - sinh vật tố - peroxy hóa vật môi hợp chất pháp (avidin-biotin-peroxidase complex method, ABC pháp ); hiện thị thượng có phối chế thành ABC dược hộp cung ứng, sử dụng giản tiện, là rộng khắp ứng dụng một loại phương pháp.[1]
