Hạn chế tính acid nucleic nội thiết môi ( lại danh hạn chế tính nội thiết acid nucleic môi ) là có thể phân biệt cũng bám vào riêng Nucleotit danh sách, cũng đối mỗi điều liên trung riêng bộ vị hai cáiKhử ô-xy hạch đường NucleotitChi gianAxit phosphoric nhị chỉ kiệnTiến hành cắt một loại môi, tên gọi tắt hạn chế môi. Căn cứ hạn chế môi kết cấu,Phụ ước sốNhu cầuThiết vịCùngTác dụng phương thức,Nhưng đem hạn chế môi chia làm ba loại loại hình, phân biệt là đệ nhất hình ( Type I ), đệ nhị hình ( Type II ) thi đậu tam hình ( Type III ). Ⅰ hình hạn chế tính nội thiết môi đã có thể thôi hóa ký chủDNANhóm methyl hóa,Lại thôi hóa phi nhóm methyl hóa DNA thuỷ phân; mà Ⅱ hình hạn chế tính nội thiết môi chỉ thôi hóa phi nhóm methyl hóa DNA thuỷ phân. Ⅲ hình hạn chế tính nội thiết môi đồng thời có tân trang cập nhận tri cắt tác dụng.
- Tiếng Trung danh
- Hạn chế tính acid nucleic nội thiết môi
- Ngoại văn danh
- Restriction endonuclease
- Tương ứng ngành học
- Gien công trình
- Làm dùng
- Cắt DNA
- Đừng danh
- Hạn chế môi hạn chế tính nội thiết môi
Dùng để phân biệt riêngKhử ô-xy NucleotitDanh sách, cũng đối mỗi điều liên trung riêng bộ vị hai cáiKhử ô-xy hạch đường NucleotitChi gianAxit phosphoric nhị chỉ kiệnTiến hành cắt một loại môi[1].
Hạn chế tính acid nucleic nội thiết môiBiệt danh: restricti đính chiếu on end nói tương on liêu thể đóa u nhiều cùng hiểu ương clease tên gọi tắt hạn chế môi
Môi phản ứng:Hạn chế tính nội thiết môi có thể phân liệtDNA phần tửNhuận luyện dặn bảo ở một hạn định số lượng chuyên nhất bộ vị thượng. Nó có thể phân biệtNgoại sinh DNACũng đem này thoái biến.
Đơn vị định nghĩa: Ở nói rõ pH cùng 37℃, ở 0.05mL phản ứng chất hỗn hợp trung, 1 giờ tiêu hóa 1μg λDNA môi lượng vì 1 đơn vị.
Tính trạng chế phẩm không chứa phi chuyên nhất acid nucleicThuỷ phân môi( từ 10 đơn vị nội thiết môi cùng 1μg λDNA, bảo ngưu kiện tặng ôn 16 giờ đoạt đượcNgưng keo điện vịnhĐồ phổ khuyên mốc lương ổn định tính tỏ vẻ ), loại này môi chủ yếu là từNguyên hạch sinh vậtTrung tách ra tới, cho tới nay đã từ gần 300 nhiều loại bất đồng vi sinh vật trung tách ra ước 4000 loại hạn chế môi.
Hạn chế tính acid nucleic nội thiết môi phân bố cực lớn, cơ hồ ở sở hữu vi khuẩn thuộc, loại trung đều phát hiện ít nhất một loại hạn chế tính nội thiết môi, nhiều giả ở một thuộc trung liền có mấy chục loại, tỷ như ởThị huyết khuẩn que thuộcTrung ( Haemophilus ) hiện đã phát hiện liền có 22 loại. Có khuẩn cây hàm môi lượng cực thấp, rất khó chia lìa định tính; nhưng mà ở có khuẩn cây trung, môi hàm lượng cực cao ． như E. coli pMB4 (EcoRIMôi ) cùng H. aegyptius (Chia lìa tinh luyệnRa nhưng tiêu hóa 10gλ phệ khuẩn thểDNAMôi lượng. Vi khuẩn là hạn chế tính nội thiết môi, đặc biệt làĐặc dị tínhPhi thường cường I loại hạn chế tính nội thiết môi chủ yếu nơi phát ra.
Căn cứ môiCông năng đặc tính,Lớn nhỏ cậpPhản ứng khiSở cầnPhụ trợ ước số,Hạn chế tính nội thiết môi nhưng chia làm hai đại loại, tức I loại môi cùng Ⅱ môi. Sớm nhất từĐại tràng khuẩn queTrung phát hiện EcoK, EcoB liền thuộc về I loại môi. Này phân tử lượng trọng đại;Phản ứng quá trìnhTrung trừ cần Mg2+Ngoại, còn cần S-Tuyến đại-LGiáp lưu Amonia toan,ATP;ỞDNA phần tửThượng không có đặc dị tính môi giải đoạn ngắn, đây là I, Ⅱ loại môi chi gian nhất rõ ràng sai biệt. Bởi vậy, I loại môi làm DNA phân tíchCông cụ giá trịKhông lớn. Ⅱ loại môi có EcoR I,BamH I,Hind Ⅱ, Hind Ⅲ chờ. Này phân tử lượng nhỏ hơn 105 nói ngươi đốn; phản ứng chỉ cần Mg2+;Quan trọng nhất chính là ở sở phân biệt riêng kiềm cơ trình tự thượng có đặc dị tínhTiếp điểm,Cho nên DNA phần tử trải qua Ⅱ loại môi tác dụng sau, nhưng sinh ra đặc dị tính môi giải đoạn ngắn, này đó đoạn ngắn nhưng dùng ngưng keo điện vịnh pháp tiến hành chia lìa, phân biệt.
Hạn chế tính nội thiết môi phân biệtDNA danh sáchTrungHồi văn danh sách.Có chút môi cắt vị điểm ở Hồi văn một bên ( như EcoR I, BamH I, Hind chờ ), cho nên nhưng hình thành dính tính phía cuối, một khác chút Ⅱ loại môi nhưAlu I,BsuR I,Bal I,Hal Ⅲ, HPa I,Sma IChờ, cắt vị điểm ở Hồi văn danh sách trung gian, hình thành san bằng phía cuối. Alu I cắt vị điểm như sau:
5'-A G^C T-3'
3'-T C^G A-5'
Ở đã phát hiện hạn chế tính nội thiết môi trung, gần trăm loại môi phân biệt trình tự đã bị trắc định. Có rất nhiều nơi phát ra bất đồng môi có tương đồngKiềm cơ phân biệtTrình tự, loại này môi xưng là “Dị nguyênCùng công môi”( isochizomer, cùng thiết hạn chế nội thiết môi;Cùng nứt môi). Hẳn là chú ý chính là, này đó môi tuy rằng có tương đồng phân biệt trình tự, nhưng chúng nó tiếp điểm cũng không hoàn toàn giống nhau. Tỷ như Xma I cùng Sma I đều phân biệt sáu NucleotitCCCGGG, nhưng Xma I tiếp điểm ở CCCCGGG, mà Ema I tiếp điểm thì tại CCCGGGG, người trước cắt DNA phần tử, hình thành có chứa CCGGDính tính phía cuốiDNA đoạn ngắn, mà người sau cũng không hình thành dính tính phía cuối ( mà kêuBình phía cuối). Đương nhiên, cũng có phân biệt trình tự cùng tiếp điểm đều tương đồng môi, như Hap Ⅱ, Hpa Ⅱ, Mno I, đều ở phân biệt trình tự CCGG nội có một tương đồng tiếp điểm, Hal Ⅲ cùng BsuR I đồng dạng ở phân biệt trình tự GGCC nội có một tương đồng tiếp điểm.
Dùng cho DNA gien tổVật lý đồ phổTổ kiến; gien định vị cùngGien chia lìa;DNA phần tử kiềm cơ danh sách phân tích; tương đối tương quan DNA phần tử cùngCông trình di truyền;Tiến hànhGien công trìnhBiên tập.
Hạn chế tính acid nucleic nội thiết môi là từ vi khuẩn sinh ra, này sinh lý ý nghĩa là đề cao tự thân phòng ngự năng lực.
Hạn chế môi mệnh danh là căn cứ vi khuẩn chủng loại mà định, lấy EcoRI vì lệ:
E | Escherichia | ( thuộc ) |
co | coli | ( loại ) |
R | RY13 | ( phẩm hệ ) |
I | Đầu tiên phát hiện | Tại đây loại vi khuẩn trung phát hiện trình tự |
Đồng thời có tân trang ( modification ) cập phân biệt cắt (restriction) tác dụng; có khác phân biệt ( recognize)DNA thượng riêng kiềm cơ danh sách năng lực, thông thường này cắt vị ( cleavage site ) khoảng cách phân biệt vị ( recognition site ) có thể đạt tới mấy ngàn cái kiềm cơ xa. Tỷ như:EcoB,EcoK.
Chỉ có phân biệt cắt tác dụng,Tân trang tác dụngTừ mặt khác môi tiến hành. Sở phân biệt vị trí nhiều vì đoảnHồi văn danh sách( palindrome sequence ); sở chia cắt kiềm cơ danh sách thông thường tức vì sở phân biệt danh sách. LàCông trình di truyềnThượng, thực dụng tính so cao hạn chế môi chủng loại. Tỷ như:EcoRI,HindⅢ.
Cùng đệ nhất hình hạn chế môi cùng loại, đồng thời có tân trang cập phân biệt cắt tác dụng. Nhưng phân biệt đoản không đối xứng danh sách, cắt vị cùngPhân biệt danh sáchƯớc cự 24-26 cáiKiềm cơ đối.Tỷ như:HinfⅢ.
Hạn chế tác dụngThực tế chính là hạn chế môi thoái biếnNgoại sinh DNA[1],Giữ gìn ký chủ di truyền ổn định bảo hộ cơ chế.Nhóm methyl hóaLà thường thấy tân trang tác dụng, có thể làm choTuyến piu-rinA cùngBào pirimidinC nhóm methyl hóa mà đã chịu bảo hộ. Thông quaNhóm methyl hóa thành dùngĐạt tới phân biệt tự thânDi truyền vật chấtCùng ngoại lai di truyền vật chất mục đích. Cho nên, có thể sinh ra phòng ngự virus xâm nhiễm hạn chế môi vi khuẩn, sở hữuGien tổTrung khả năng có nên môi phân biệt danh sách, chỉ là nên phân biệt danh sách hoặcMôi thiết vị điểmBị nhóm methyl hóa. Nhưng cũng không phải nói một khiNhóm methyl hóa,Sở hữu hạn chế môi đều không thể cắt. Đại đa số hạn chế môi đốiDNA nhóm methyl hóaMẫn cảm, bởi vậy đương hạn chế môi mục tiêu danh sách cùng nhóm methyl hóa vị điểm trùng điệp khi, đối môi thiết ảnh hưởng có 3 loại khả năng, tức không ảnh hưởng, bộ phận ảnh hưởng, hoàn toàn ngăn cản. Đối nhóm methyl hóa DNA cắt năng lực là hạn chế môi nội tại cùng không thể đoán trước đặc tính, bởi vậy, vì hữu hiệu cắt DNA, cần thiết đồng thời suy xét DNA nhóm methyl hóa cùng hạn chế môi đối nên loại hình nhóm methyl hóaMẫn cảm tính.Mặt khác, đại bộ phận thương nghiệp hạn chế môi hiện giờ chuyên môn dùng cho cắt nhóm methyl hóa DNA.
