PCR u realnom vremenu

Zeleno fluorescentni prikaz pet uzoraka, od kojih svaki ima tri replikata (rezultat primjene kvantitativnePCRtehnike (qPCR)

Kriva stapanja za pet uzoraka, tri replicira svaki, što je rezultat analize temperatura topljenja: kvantitativni rezultati primjene PCR (qPCR).

PCR u realnom vremenuilikvantitativna polimerazna lančana reakcija(eng.Real-TimePolymeraseChainReaction), skraćenoRTPCR,je laboratorijska tehnika umolekularnoj biologijikoja je bazirana napolimeraznoj lančanoj reakciji(PCR). Primjenjuje se za umnožavanje i simultanu detekciju ili kvantifikaciju culjane molekuleDNK. Postupak slijedi opšti princip polimerazne lančane reakcije, a ključno obilježje je karakteristika je da se umnožena DNK otkriva kako reakcija napreduje, u"realnom vremenu".Ovo je novi pristup u odnosu na standardnu PCR, gdje se detektira proizvod reakcije na svom kraju. Dva uobičajena metoda za detekciju proizvoda u kvantitativnom PCR-u su:

1. nespecifičnifluorescentnom bojomkoja jeumetnutau bilo koji od dva polulanca DNK, i
2. sekvencno-specifičneDNK sonde,sastavljene odoligonukleotida,označenihfluorescentnimreporterom koji dopušta detekciju tek nakonhibridizacijesonde sa svojom komplementarnom sekvencom i kvantificiraRNK(iRNK) inekodirajuću RNKu ćelijama ili tkivu.

Kao minimum informacija za objavljivanje rezultta kvantitativnih RT-PCR eksperimenata (MIQE), zvanično uputstvo je predložilo smjernicu da se skraćenicaqPCRkoristiti za PCR u realnom vremenu kvantitativno i da se RT-qPCR koristiti za reverznu transkripciju -qPCR.Akronim "RT-PCR" obično označava reverznu transkripciju lančane reakcije polimeraze, a ne real-time PCR, ali svi autori se izgleda ne pridržavaju ove konvencije.