Aller au contenu

Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats

Un article de Wikipédia, l'encyclopédie libre.

CRISPR/Cas9.
Diagramme du mécanisme de CRISPR.

Engénétique,lesClustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats(« Courtes répétitionspalindromiquesgroupées et régulièrement espacées »), plus fréquemment désignées sous le nom deCRISPR(acronymeprononcé/ˈkrɪspəʳ/), sont des familles deséquencesrépétées dans l'ADN.De telles familles se caractérisent par des séries de répétitions directes courtes (de 21 à 37 paires debases) et régulièrement espacées par des séquences appelées«spacer»,généralement uniques, de 20 à 40paires de bases.

Engénie génétique,le système CRISPR-Cas9,d'abord utilisé pour typer dessouchesdebactériesest récemment devenu un outil demanipulation génétiqueà fort potentiel[1].CRISPR-Cas9est notamment utilisé comme ciseau moléculaire afin d'introduire des modifications locales dugénome(manipulations souvent qualifiées d'édition génomique) de nombreux organismes modèles.

Première observation et redécouvertes successives[modifier|modifier le code]

Cette structure répétée a été observée pour la première fois par Yoshizumi Ishino[2]en1987chezEscherichia coli.Elle a ensuite été décrite plusieurs fois sous différents noms:

  • LCTR pourLong Clusters of Tandem Repeats.Deux de ces régions sont associées à des LCTR (typique desArchæa) ce qui supporte l’idée que ces LCTR soient impliqués dans le transfert de gènes[3];
  • SPIDR pourSpacer Interspaced Direct Repeats[4];
  • TREP pourTandem REPeats[5];
  • DVR pourDirect Variable Repeats[6];
  • SRSR pourShort Regularly Spaced Repeats[7].

Un article de Juan Francisco Martínez Mojica de 2000[7]démontre que toutes les descriptions précédentes n'étaient que des facettes d'une seule et même entité. En 2002, Jansen décide, avec l'accord du groupe de Mojica, de clarifier la nomenclature en créant l'acronyme CRISPR[8].

Si la séquence répétée est bien conservée au sein d'un organisme, le nombre d'unités au sein d'un train, le nombre de trains et même la présence de trains sont des quantités hautement variables d'une lignée à une autre[9].De fait, les CRISPR ont été utilisés pour typer des souches bactériennes, une technique appeléespoligotypage[10],[11].

Répartition dans le monde vivant[modifier|modifier le code]

Ces répétitions se rencontrent dans les lignées d'archéeset debactéries,mais n'ont pas encore été observées chez leseucaryotes.Chez lesvirus,il a été montré que desbactériophagescodent le système CRISPR-Cas[12].Les CRISPR pourraient être la famille de répétition la plus largement répandue dans le monde vivant[7],avec un peu moins de la moitié des organismes séquencés porteurs de ce type de répétitions (sur plus de 200 génomes testés à la fin de 2005[13]). Les régions CRISPR sont présents chez la plupart des archées thermophiles et la moitié des espèces bactériennes (jusqu'à 10 % du génome chez certaines archées analysées)[14],concernant aussi bien les bactéries àGram+que les bactéries àGram-[15].Certains plasmides d'archées sont porteurs de CRISPR homologues de ceux portés par l'organisme hôte. C'est le cas par exemple deSulfolobuset du plasmide pNOB8[16],[17].Certains auteurs ont signalé la présence de CRISPR dans l'ADN mitochondrial(Flamand, 1992)[réf. à confirmer],mais ces résultats n'ont pas pu être reproduits.

Structure[modifier|modifier le code]

Cette section a besoin d'êtrerecyclée(août 2015).
Une réorganisation et une clarification du contenu sont nécessaires.Améliorez-laoudiscutez des points à améliorer.

Les locus CRISPR sont caractérisés par une alternance de répétitions directes ou «direct repeats» (c'est-à-dire toutes orientées dans le même sens de lecture), courtes (de 21 à 37 paires de bases) et régulièrement espacées par des séquences appelées «spacers», généralement uniques, de 20 à 40 paires de bases. Les séquences nucléotidiques et la longueur des locus CRISPR sont conservées pour une même espèce, mais varient d'une espèce à l'autre[4],[18].Les locus CRISPR sont généralement adjacents aux gènescas(pour «CRISPR associated»)[18],dont ils sont séparés par une séquence de 300 à 500 paires de bases, appelée séquence «leader»[8].

Les premiers éléments sur la façon dont la structure CRISPR elle-même (c'est-à-dire la portion constituée de la succession dedirect repeatset despacers) évolue ont été fournis par le travail de Pourcelet al.[19].Ce travail, portant sur les locus CRISPR deYersinia pestis,a montré que l'acquisition de nouveauxspacersétait polarisée, alors que la perte d'un ou plusieurs «spacers» pouvait survenir tout au long du locus CRISPR. L'acquisition survient de façon adjacente auleader.Leleaderest conservé dans la lignée mais pas entre les lignées[4].

Gènescas[modifier|modifier le code]

Cette section a besoin d'êtrerecyclée(août 2015).
Une réorganisation et une clarification du contenu sont nécessaires.Améliorez-laoudiscutez des points à améliorer.

Rencontrés uniquement dans les génomes porteurs de CRISPR, les gènescassont généralement situés à proximité des locus CRISPR. Dès 2005, au moins 45 familles de gènes de ce type ont été décrites. Les 4 premières étant strictement associées[13].Le plus important de ces gènes estcas1,présent dans presque tous les complexes CRISPR-Cas (parfois notés CRISPR/Cas). La distribution sporadique des sous-types CRISPR-Cas suggère plusieurs évènements de transferts horizontaux au cours de l'évolution microbienne. Les systèmes CRISPR-Cas peuvent être très étendus (jusqu'à 20 gènes différents) et semblent présenter des schémas différents d'une lignée à l'autre, qui ne se retrouvent que dans un nombre très limité d'espèces. Les gènescasrepérés chez des organismes hyperthermophiles ont d'abord été vus comme jouant un rôle de réparation de l'ADN[17].

Rôles[modifier|modifier le code]

Si les fonctions des CRISPR n'ont pas encore été clairement identifiées, un certain nombre d'hypothèses ont été avancées:

  • les CRISPR sont impliqués dans la répartition des copies de génomes au cours de la division (expériences menées surHaloferaxmediterranei[5]). Des similitudes avec certains mécanismes de partition de plasmides suggèrent que les CRISPR sont des analogues des séquences de partitionnement bactériennes. Sans être vital pour la cellule puisque certaines lignées en sont dépourvues[7];
  • les CRISPR ont un rôle de perturbateur chromosomique en permettant des recombinaisons et sont impliqués dans le système de restauration chromosomique à la suite d'un réarrangement[7]:il a été montré qu'il y a une relation forte entre les CRISPR et les réarrangements[20].Le motif répété faciliterait les recombinaisons;
  • deux de ces régions sont associées à des LCTR (typiques desArchæa) ce qui supporte l’idée que ces LCTR sont impliqués dans le transfert de gènes[3].Nelson a proposé que les CRISPR sont associés à l'origine de réplicationet jouent un rôle dans le processus de réplication duchromosome(il a placé le nucléotide 1 comme étant le premier d'un CRISPR);
  • chez les archées, site de fixation pour la formation denucléosomes(enroulement de l’ADN autour de protéines similaires à des histones) permettant de protéger l’ADN ou de réguler l’expression génique[21];
  • ces séquences forment des structures secondaires (épingles, Z-DNA et H-DNA) ayant des fonctions de régulation ou de protection[21].

Rôle « immunitaire » du système CRISPR-Cas[modifier|modifier le code]

Cette section a besoin d'êtrerecyclée(août 2015).
Une réorganisation et une clarification du contenu sont nécessaires.Améliorez-laoudiscutez des points à améliorer.

En 2005, on observe que les séquences de certainsspacerssont identiques à celles de certainséléments génétiques mobiles,notamment de virus et de plasmides[22],[19],[23].

En mars 2007, l'équipe de Philippe Horvath a montré que l'exposition de cellules porteuses de CRISPR à desphagesentraîne l'apparition de nouveaux intervalles, que ces intervalles dérivent du matériel génomique des phages et que le retrait ou l'ajout de ces intervalles modifie la résistance des bactéries face aux phages[24].

Le système CRISPR-Cas (CASS) est un mécanisme de défense contre lesphagesetplasmidesinvasifs, fonctionnant d'une manière analogue à celle du système ARNi deseucaryotes.En intégrant des fragments de gènes étrangers dans des parties non codantes de leur chromosomes, archées ou bactéries acquièrent une résistance aux phages et plasmides. Il s'agit donc d'une forme desystème immunitairehéritable par transmission aux cellules filles, permettant aux archées et aux bactéries de s'adapter rapidement à l'évolution des phages et des plasmides[8],[22],[19],[25].En 2020, une étude explicite comment des marqueurs dérivés des génomes des différents virus rencontrés s'accumulent d'une manière chronologiquement ordonnée (à la manière d'un « enregistreur ADN ») dans la région CRISPR de leur génome[26].C'est la phase d’immunisation. S'ensuit une immunité: les protéines Cas utilisent ces informations pour reconnaitre et désactiver tout virus de signature déjà connue[27].

Il a été montré que les phages pouvaient contourner le système CRISPR-Cas via des gènes spécifiques[28].

Les systèmes CRISPR-Cas observés chez les bactéries et les archées d'une part et lesystème ARNiobservé chez les eucaryotes d'autre part ne semblent pas dériver d'un ancêtre commun. Ils ne sont donc pas homologues.

Mécanismes moléculaires[modifier|modifier le code]

Les systèmes CRISPR utilisent les gènescas1etcas2qui sont impliqués dans l'intégration, en tant quespacerde fragments de gènes étrangers dans le CRISPR.

Trois types de systèmes CRISPR-Cas sont connus[29]:

  • les systèmes de types I, utilisent un complexe Cascade pour cliver lestranscritsde CRISPR au niveau desépingles.Lorsqu'un complexe Cascade/spacers'associe à un ADN cible (reconnaissance parhybridations) il recrute la protéine Cas3 quicliveun brin de l'ADN cible;
  • les systèmes de types II, utilisent la RNAse III pour séparer les répétitions des transcrits. La protéineCas9s'associe avec un fragment de transcrit et, lors de la reconnaissance d'un ADN cible, Cas9 clive les 2 brins de cet ADN;
  • les systèmes de type III, utilisent la protéine Cas6 pour cliver lestranscritsde CRISPR au niveau desépingles,les segments de transcrits obtenus s'associent avec un complexe Cas10. Ce système requiert qu'il y ait transcription de l'ADN cible, le complexe Cas10/spacerclive alors un brin de l'ADN cible (brin non transcrit), ainsi que l'ARN en cours de transcription.

Utilisation en biologie moléculaire[modifier|modifier le code]

Articles détaillés:Cas9etActivation CRISPR.

Le système CRISPR-Cas9,notamment tel que développé par la chercheuse françaiseEmmanuelle Charpentiersur la base d'une idée qu'elle a eue à Vienne au début des années 2000 (pour lequel elle obtient le prix Nobel) est depuis lesannées 2010devenu un outil de génie génétique révolutionnaire permettant de modifier plus facilement et plus précisément les séquences d’ADN, et utilisé pour desthérapies géniquesassocié à unvecteur souvent viral[30].

Il est aussi utilisé pourexprimerdes gènes grâce à l'activation CRISPR,entre autres pourreprogrammerdes cellules.

Découverte[modifier|modifier le code]

La technique d'édition de génomeCRISPR-Cas9 a été découverte par l'équipe de la chercheuse françaiseEmmanuelle Charpentieraidée par la professeure américaine Jennifer Doudna. Elle a été par la suite développée à partir de 2012 par plusieurs chercheurs, dont notamment le biologiste moléculaireFeng Zhang,duBroad Institute(associé àHarvardet auMIT).

En avril 2016 Charpentier a présenté dans le journalNatureune nouvelle version plus performante d'utilisation du CRISPR[1].

Brevets et entreprise[modifier|modifier le code]

CRISPR Therapeutics,jeune entreprisecofondée parEmmanuelle Charpentierpour breveter et développer cet outil est devenue l'une des sociétés de biotechnologies précliniques les plus richement financées dans le monde, mais est en conflit concernant le brevetage de cette technologie[31],[1].

En2021,Wageningen University & Research a annoncé avoir décidé d'ouvrir ses brevets d'édition de gènes CRISPR-Cas à des ONG à but non lucratif (sous forme de licences gratuites) pour des applications non commerciales (par exemple pour améliorer les végétaux alimentaire cultivés dans les pays pauvres, plus rapidement que via la sélection végétale conventionnelle)[32].

Berkeley conteste devant une commission d'appel duUnited States Patent and Trademark Officelebrevetaccordé au Broad Institute pour cette découverte[33].Le 15 février 2017, l'United States Patent and Trademark Officea considéré que les brevets déposés par le Broad Institute sur l'usage de CRISPR/Cas9 dans le cas decellules eucaryotesétaient valides. Pour autant, les revendications de l'Université de Berkeley(à l'origine des dépôts de brevets deJennifer Doudnaet d'Emmanuelle Charpentier) quant à l'emploi de CRISPR/Cas9 sur tous types de matériel génétique (y compris les cellules eucaryotes) n'ont pas été rejetées[34],[35].En janvier 2018, l'Office européen des brevetsa révoqué un des principaux brevets concernant CRISPR-Cas9 déposé (et accepté dans un premier temps) par le Broad Institute. Ce dernier a fait appel de la décision[36].

Éthique[modifier|modifier le code]

Cette technique suscite des questions d'éthique médicaleetenvironnementalequant à l'eugénismeet aux conséquences environnementales de la manipulation du génome, quand cet outil est appliqué à des cellules héréditaires[37],[38].Un certain nombre de scientifiques et d'autres personnalités ont lancé un appel pour une éthique de la conservation sans le pilotage des gènes, considérant qu'elle détient le potentiel de transformer absolument le monde de la nature et les rapports des humains avec celui-ci. Ce qui revient à proposer délibérément l’extinction comme outil[39].

Le congrès mondial de la nature de septembre 2016 a voté une motion demandant à la directrice générale et aux commissions de l'UICNd'évaluer « de toute urgence les incidences des techniques deforçage génétiqueet d'autres techniques apparentées et leurs effets possibles sur la conservation et l'utilisation durable de la diversité biologique, ainsi que le partage équitable des avantages découlant des ressources génétiques, afin que l'UICN élabore des orientations sur ce thème, tout en s'abstenant de soutenir ou d'approuver des activités de recherche, y compris des essais sur le terrain, portant sur l'utilisation de techniques de forçage génétique à des fins de conservation ou autres tant que cette évaluation n'aura pas été réalisée »[40]

Culture populaire[modifier|modifier le code]

  • Le système CRISPR-cas9 est à la base de l'expérience ratée du filmRampage: Hors de contrôle.
  • Le système CRISPR-cas9 intervient dans l'intrigue du roman deRobin Cook:Pandémie.

Annexes[modifier|modifier le code]

Bibliographie[modifier|modifier le code]

  • (en)Joy Y. Wang et Jennifer A. Doudna, «CRISPR technology: A decade of genome editing is only the beginning»,Science,vol.379,no6629,‎(DOI10.1126/science.add8643)

Articles connexes[modifier|modifier le code]

Liens externes[modifier|modifier le code]

Notes et références[modifier|modifier le code]

  1. ↑abetcA. Abbott, « The quiet revolutionary: How the co-discovery of CRISPR explosively changed Emmanuelle Charpentier’s life The microbiologist spent years moving labs and relishing solitude. Then her work on gene-editing thrust her into the scientific spotlight »,Nature,no532, 28 avril 2016, pp. 432-434, doi:10.1038/532432a.
  2. ↑(en)Yoshizumi Ishino, Hideo Shinagawa, Kozo Makino, Mitsuko Amemura et Atsuo Nakata, «Nucleotide sequence of the iap gene, responsible for alkaline phosphatase isozyme conversion in Escherichia coli, and identification of the gene product»,Journal of Bacteriology,vol.169,no12,‎,p.5429-5433(PMID3316184).
  3. ↑aetb(en)K. E. Nelsonet al.,«Evidence for lateral gene transfer between Archæa and bacteria from genome sequence of Thermotoga maritima»,Nature,vol.399,no6734,‎,p.323-9(PMID10360571).
  4. ↑abetc(en)Ruud Jansen, Jan D. A. van Embden, Wim Gaastra et Leo M. Schouls, «Identification of a novel family of sequence repeats among prokaryotes»,OMICS,vol.6,no1,‎,p.23-33(PMID11883425).
  5. ↑aetb(en)Mojica Franciscoet al.,«Long stretches of short tandem repeats are present in the largest replicons of the Archæa Haloferax mediterranei and Haloferax volcanii and could be involved in replicon partitioning»,Molecular Microbiology,vol.17,no1,‎,p.85-93(PMID7476211).
  6. ↑(en)A. Aranaz, «Spoligotyping profile change caused by deletion of a direct variable repeat in a Mycobacterium tuberculosis isogenic laboratory strain»,Journal of Clinical Mirobiology,vol.42,no11,‎,p.5388-91(PMID15528751).
  7. ↑abcdete(en)Francisco Mojica, Cesar Diez-Villaseñor, Elena Soria et Guadalupe Juez, «Biological significance of a family of regularly spaced repeats in the genomes of Archæa, Bacteria and mitochondria»,Molecular Microbiology,vol.36,no1,‎,p.244-246(PMID10760181).
  8. ↑abetc(en)Ruud Jansen, Jan D. A. van Embden, Wim Gaastra et Leo M. Schouls, «Identification of genes that are associated with DNA repeats in prokaryotes»,Molecular Microbiology,vol.43,no6,‎,p.1565-1575(PMID11952905,lire en ligne,consulté le).
  9. ↑(en)J. D. van Embdenet al.,«Genetic variation and evolutionary origin of the direct repeat locus of Mycobacterium tuberculosis complex bacteria»,Journal of Bacteriology,vol.182,no9,‎,p.2393-401(PMID10762237).
  10. ↑(en)J. Kamerbeeket al.,«Simultaneous detection and strain differentiation of Mycobacterium tuberculosis for diagnosis and epidemiology»,Journal of Clinical Microbiology,vol.35,no4,‎,p.907-14(PMID9157152).
  11. ↑(en)Hoeet al.,«Rapid molecular genetic subtyping of serotype M1 group A Streptococcus strains»,Emerging Infectious Diseases,vol.5,no2,‎,p.254-63(PMID10221878).
  12. ↑(en)Kimberley D.Seed,David W.Lazinski,Stephen B.Calderwoodet AndrewCamilli,«A bacteriophage encodes its own CRISPR/Cas adaptive response to evade host innate immunity»,Nature,vol.494,no7438,‎,p.489-91(PMID23446421,PMCID3587790,DOI10.1038/nature11927,lire en ligne,consulté le).
  13. ↑aetb(en)Daniel H. Haft, Jeremy Selengut, Emmanuel F. Mongodin et Karen E. Nelson, «A Guild of 45 CRISPR-Associated (Cas) Protein Families and Multiple CRISPR/Cas Subtypes Exist in Prokaryotic Genomes»,PLOS Computational Biology,vol.1,no6,‎,p.1-10(PMID16292354,PMCIDPMC1282333,lire en ligne,consulté le).
  14. ↑(en)K. S. Makarova, Y. I. Wolf et E. V. Koonin, «Comparative genomics of defense systems in archæa and bacteria»,Nucleic Acids Research,vol.41,no8,‎,p.4360-4377(PMID23470997,PMCIDPMC3632139,DOI10.1093/nar/gkt157,lire en ligne,consulté le).
  15. ↑(en)Reidun K. Lillestøl, Peter Redder, Roger A. Garrett et Kim Brüger, «A putative viral defense mechanism in archæal cells»,Archæa,vol.2,no1,‎,p.59-72(PMID16877322,PMCIDPMC2685585,lire en ligne,consulté le).
  16. ↑(en)Xu Peng, Kim Brügger, Biao Shen, Lanming Chen, Qunxin She et Roger A. Garrett, «Genus-Specific Protein Binding to the Large Clusters of DNA Repeats (Short regularly Spaced Repeats) Present in Sulfolobus Genomes»,Journal of Bacteriology,vol.185,no8,‎,p.2410-7(PMID12670964,PMCIDPMC152625,lire en ligne,consulté le).
  17. ↑aetb(en)Makarova KS, L. Aravind, N. V. Grishin, I. B. Rogozin et E. V. Koonin, «A DNA repair system specific for thermophilic archæa and bacteria predicted by genomic context analysis»,Nucleic Acid Research,vol.30,no2,‎,p.482-96(PMID11788711,PMCIDPMC99818,lire en ligne,consulté le).
  18. ↑aetb(en)John van der Oost, Edze R. Westra, Ryan N. Jackson et Blake Wiedenheft, «Unravelling the structural and mechanistic basis of CRISPR-Cas systems»,Nature Reviews Microbiology,vol.12,no7,‎,p.479-492(PMID24909109,PMCIDPMC4225775,DOI10.1038/nrmicro3279,lire en ligne,consulté le).
  19. ↑abetc(en)C. Pourcel, G. Salvignol et G. Vergnaud, «CRISPR elements in Yersinia pestis acquire new repeats by preferential uptake of bacteriophage DNA, and provide additional tools for evolutionary studies»,Microbiology,vol.151,no3,‎,p.653-63(PMID15758212).
  20. ↑(en)R. T. DeBoy, E. F. Mongodin, J. B. Emerson et K. E. Nelson, «Chromosome evolution in the Thermotogales: large-scale inversions and strain diversification of CRISPR sequences»,Journal of Bacteriology,vol.188,no7,‎,p.2364-74(PMID16547022,PMCIDPMC1428405,lire en ligne,consulté le).
  21. ↑aetb(en)Ahmed Fadiel, Stuart Lithwick, Gopi Ganji et Stephen W. Scherer, «Remarkable sequence signatures in archæal genomes»,Archæa,vol.1,no3,‎,p.185-90(PMCIDPMC2685567,lire en ligne,consulté le).
  22. ↑aetb(en)F. J. Mojica, C. Díez-Villaseñor, J. García-Martínez et E. Soria, «Intervening sequences of regularly spaced prokaryotic repeats derive from foreign genetic elements»,Journal of molecular evolution,vol.60,no2,‎,p.174-82(PMID15791728,lire en ligne,consulté le).
  23. ↑(en)A. Bolotin, B. Quinquis, A. Sorokin et S. D. Ehrlich, «Clustered regularly interspaced short palindrome repeats (CRISPRs) have spacers of extrachromosomal origin»,Microbiology,vol.151,no8,‎,p.2551-61(PMID16079334,DOI10.1099/mic.0.28048-0,lire en ligne,consulté le).
  24. ↑(en)Rodolphe Barrangou, Christophe Fremaux, Hélène Deveau, Melissa Richards, Patrick Boyaval, Sylvain Moineau, Dennis A. Romero et Philippe Horvath, «CRISPR provides acquired resistance against viruses in prokaryotes»,Science,vol.315,no5819,‎,p.1709-1712(PMID17379808,lire en ligne,consulté le).
  25. ↑(en)Julie E.Samson,Alfonso H.Magadán,MouradSabriet SylvainMoineau,«Revenge of the phages: defeating bacterial defences»,Nature Reviews Microbiology,vol.11,no10,‎,p.675-87(PMID23979432,DOI10.1038/nrmicro3096,lire en ligne,consulté le).
  26. ↑Sungchul Kimet al.,Selective loading and processing of prespacers for precise CRISPR adaptation,2020.DOI10.1038/s41586-020-2018-1
  27. ↑La Recherche,p.22
  28. ↑(en)JoeBondy-Denomy,AprilPawluk,Karen L.Maxwellet Alan R.Davidson,«Bacteriophage genes that inactivate the CRISPR/Cas bacterial immune system»,Nature (revue),vol.493,no7432,‎,p.429-32(PMID23242138,DOI10.1038/nature11723,lire en ligne,consulté le).
  29. ↑Luciano A.Marraffini,«CRISPR-Cas immunity in prokaryotes»,Nature,vol.526,‎,p.55-61(DOI10.1038/nature15386,lire en ligne).
  30. ↑(en)«Oncology: Studying cancer genomes gene by gene could improve treatment»,The Economist,‎(lire en ligne,consulté le).
  31. ↑Heidi Ledford,How the US CRISPR patent probe will play out; Decision could determine who profits from the gene-editing technique in future,7 mars 2016.
  32. ↑(en)Johnvan der Oostet Louise O.Fresco,«Waive CRISPR patents to meet food needs in low-income countries»,Nature,vol.597,no7875,‎,p.178–178(DOI10.1038/d41586-021-02397-7,lire en ligne,consulté le)
  33. ↑Kelly Servick,« Accusations of errors and deception fly in CRISPR patent fight »,Science,8 mars 2016.
  34. ↑Sharon Begley,« Broad Institute prevails in heated dispute over CRISPR patents »,Stat,le 15 février 2017, consulté le 17 février 2017.
  35. ↑Sharon Begley,« 6 Takeaways from the CRISPR Patent Decision »,Scientific American,le 16 février 2017, consulté le 17 février 2017.
  36. ↑S. Willquist,« CRISPR patent revoked at the EPO »,Lexology,29 janvier 2018.
  37. ↑Jean-Philippe Braly, «CRISPR-Cas9: le couteau suisse qui révolutionne la génétique», surSciences actualités,(consulté le).
  38. ↑Morgane Heuclin-Reffait, «Avec «Crispr/Cas9», modifier un ADN devient presque aussi simple qu'un copier-coller», surLibération Sciences,(consulté le)
  39. ↑A Call for Conservation with a Conscience: No Place for Gene Drives in Conservation;Vandana Shiva et d’autres écologistes lancent l’alerte sur le « pilotage des gènes ».
  40. ↑Élaboration d’une politique de l’UICN sur la conservation de la biodiversité et la biologie de synthèse.
  41. ↑(en)Ibtissem Grissa, Gilles Vergnaud et Christine Pourcel, «The CRISPRdb database and tools to display CRISPRs and to generate dictionaries of spacers and repeats»,BMC Bioinformatics,vol.8,‎(PMID17521438,lire en ligne,consulté le).
  42. ↑(en)Christine Rousseau, Mathieu Gonnet, Marc Le Romancer et Jacques Nicolas, «CRISPI: a CRISPR interactive database»,Bioinformatics,vol.25,no24,‎,p.3317-3318(PMID19846435,PMCIDPMC2788928,DOI10.1093/bioinformatics/btp586,lire en ligne,consulté le).
v·m
OGM
Animaux
Plantes
Réglementation
Méthodes
Transfert d'ADN
Édition génomique
Vecteurs
Types
Applications
Agriculture
Médecine
Recherche
Articles liés
Rubriques voisines
Ce document provient de «https://fr.wikipedia.org/w/index.php?title=Clustered_Regularly_Interspaced_Short_Palindromic_Repeats&oldid=212809754».