RFLP

RFLP(RestrictionFragmentLengthPolymorphism, chế hạn diếu tố đoạn phiến trường đa hình ) とは,Chế hạn diếu tốによって thiết đoạn されたDNAĐoạn phiến の trường さが, đồng nhấtChủngNội の cá thể gian で dị なる (Đa hìnhを kỳ す ) ことを chỉ し, また転じてそれを kiểm xuất する thủ pháp も ý vị する.Nhất diêm cơ đa hìnhによってこの vi いが hiện れることもある.Di vân bệnhを trì つ nhân と trì たない nhân でこれが dị なる tràng hợp があり, chẩn đoạn や di vân bệnh の nguyên nhânDi vân tửの đồng định に lợi dụng される. Đắc られた đoạn phiến trường は,Điện khí vịnh độngによって kí tri の đoạn phiến trường のDNA( サイズマーカー ) と bỉ giác して cầu める.

ゲノムプロジェクトの tiến hành に bạn ってPCRに dụng いるプライマーの thiết kế が dung dịch になったため, hiện tại ではPCRでDNAを tăng phúc し, その phản ứng sinh thành vật を chế hạn diếu tố で thiết đoạn する thủ pháp であるPCR-RFLPが nhất bàn đích となった. PCR-RFLP dĩ tiền はヒトを đối tượng とした tràng hợp,

1. Sinh きたTế bàoの thải thủ
2. Tế bào の bồi dưỡng ( sổ nhật )
3. Bỉ giác đích cao phẩm chất なDNAの trừu xuất
4. DNAの thiết đoạn
5. Điện khí vịnh động
6. ブロッティング
7. Phóng xạ tính đồng vị nguyên tốĐẳng でラベルしたプローブのハイブリダイズ
8. X tuyến フィルムへの cảm quang ・ hiện tượng

といった thủ thuận を đạp んだ. Nhất phương, PCR-RFLPでは,

1. Bỉ giác đích thô tạp なDNAの thải thủ
2. PCR ( 2 thời gian trình độ )
3. DNAの thiết đoạn
4. Điện khí vịnh động
5. Tử ngoại tuyến によるDNAの khả thị hóa

と, bán nhật trình độ で khả năng となった.

Đoạn phiến trường の soa でĐối lập di vân tửĐẳng を thức biệt する phương pháp

Dĩ hạ にサザンブロッティングを lợi dụng した nguyên pháp を mô thức đích に kỳ す.

Cá thể A
a b c
| 2 kb | 1 kb |
DNA -----------|---------------------|---------|-------
SfaN I SfaN I SfaN I
=========
プローブと tương bổ đích な lĩnh vực

Cá thể B
a b c
| 3 kb |
DNA -----------|-------------------------------|-------
SfaN I SfaN I
=========


サザンブロッティングの kết quả ↓

5 kb _____
4 kb _____

3 kb _____ ______


2 kb _____ ______



1 kb _____


サイズ cá thể A cá thể B
マーカー

Thượng đoạn: ある sinh vật chủng 2 cá thể のゲノムDNAと chế hạn diếu tố SfaN Iによる đoạn phiến trường.
Cá thể Bにはbの vị trí の chế hạn diếu tố nhận thức bộ vị が tồn tại しない==はプローブが kết hợp する lĩnh vực.
Hạ đoạn: サザンブロッティングの kết quả. Cá thể Aでは2 kbの, cá thể Bでは3 kbの vị trí にバンドが kiến える.
( giản lược のため nhất bội thể sinh vật を tưởng định している )