Thượng hải giao thông đại học vương bình đoàn đội báo đạo liễu cơ vu khuê lâm đích quang bất ổn định bảo hộ sách lược xúc tiến đản bạch chất đích cao hiệu tổ trang. Tương quan nghiên cứu thành quả vu2022 niên 1 nguyệt 16 nhật phát biểuTại 《 mỹ quốc hóa học hội tạp chí 》.

Thiên nhiên hóa học liên tiếp ( NCL ) vi tổ trang cụ hữu tinh xác hóa học đặc chinh đích đản bạch chất đề cung liễu nhất cá cường hữu lực đích giải quyết phương án, tòng nhi năng cú tường tế nghiên cứu đản bạch chất đích kết cấu - công năng quan hệ. Tác vi NCL đích diên thân, thoát lưu hòa biểu đạt đản bạch liên tiếp ( EPL ) kỹ thuật đích phát hiện cực đại địa khoách triển liễu thông quá hóa học liên tiếp hoạch đắc đại hình hoặc cụ hữu thiêu chiến tính đích đản bạch chất tự liệt đích hữu hiệu đồ kính. Tẫn quản kỳ ưu việt đích khả kháo tính, NCL thoát lưu hiệp nghị nhu yếu chính giao bảo hộ sách lược, dĩ năng cú tại thiên nhiên Cys tồn tại đích tình huống hạ tiến hành tuyển trạch tính thoát lưu, giá đối kỳ hợp thành ứng dụng chí quan trọng yếu. Dữ truyện thống đích lưu thuần bảo hộ cơ đoàn tương bỉ, quang bất ổn định bảo hộ cơ đoàn ( PPGs ) tại phúc chiếu hậu bị khứ trừ, giản hóa liễu đản bạch chất tổ trang, nhân thử đối thái chi giá đích nhiễu động tối tiểu. Nhiên nhi, mục tiền đích PPG sách lược chủ yếu cục hạn vu tiêu cơ biện cơ diễn sinh vật, kỳ NCL thoát lưu bất kiêm dung.

Cai văn trung, nghiên cứu nhân viên thủ thứ đề xuất cơ vu khuê lâm đích bán quang an toan PPG khả xúc tiến các chủng liên tiếp sách lược, bao quát điệt đại NCL hòa EPL thoát lưu phương pháp. Đản bạch chất tự liệt trung đa cá bán quang an toan tàn cơ đích 7- ( phái tần -1- cơ ) -2- ( giáp cơ ) khuê lâm cơ ( PPZQ ) CAG khả thông quá hậu kỳ tu sức dung dịch dẫn nhập, nhi PPZQ tại thủy ngưng giao hoãn trùng dịch trung thông quá quang giải khả dĩ cao hiệu địa vô tích khứ trừ. Thử ngoại, PPZQ cơ đoàn dữ tự do cơ thoát lưu tương dung. Thông quá nhất oa điệt đại liên tiếp pháp hòa EPL thoát lưu pháp hợp thành γ- đột xúc hạch đản bạch hòa lân toan hóa bán quang an toan đản bạch môi ức chế tề -S đột xuất liễu cai sách lược đích hiệu suất. Thử ngoại, đối biểu đạt đích bạch giới tố -34 phiến đoạn đích thành công đích lục bội bảo hộ hòa khứ bảo hộ biểu minh liễu cai sách lược tại đản bạch chất lung hóa / thoát lung nghiên cứu trung đích cự đại tiềm lực.

Phụ: Anh văn nguyên văn

Title: Quinoline-Based Photolabile Protection Strategy Facilitates Efficient Protein Assembly

Author: Siyao Wang, Qingqing Zhou, Yunxue Li, Bingcheng Wei, Xinliang Liu, Jie Zhao, Farong Ye, Zhongneng Zhou, Bei Ding, Ping Wang

Issue&Volume: January 16, 2022

Abstract: Native chemical ligation (NCL) provides a powerful solution to assemble proteins with precise chemical features, which enables a detailed investigation of the protein structure–function relationship. As an extension to NCL, the discovery of desulfurization and expressed protein ligation (EPL) techniques has greatly expanded the efficient access to large or challenging protein sequences via chemical ligations. Despite its superior reliability, the NCL-desulfurization protocol requires orthogonal protection strategies to allow selective desulfurization in the presence of native Cys, which is crucial to its synthetic application. In contrast to traditional thiol protecting groups, photolabile protecting groups (PPGs), which are removed upon irradiation, simplify protein assembly and therefore provide minimal perturbation to the peptide scaffold. However, current PPG strategies are mainly limited to nitro-benzyl derivatives, which are incompatible with NCL-desulfurization. Herein, we present for the first time that quinoline-based PPG for cysteine can facilitate various ligation strategies, including iterative NCL and EPL-desulfurization methods. 7-(Piperazin-1-yl)-2-(methyl)quinolinyl (PPZQ) caging of multiple cysteine residues within the protein sequence can be readily introduced via late-stage modification, while the traceless removal of PPZQ is highly efficient via photolysis in an aqueous buffer. In addition, the PPZQ group is compatible with radical desulfurization. The efficiency of this strategy has been highlighted by the synthesis of γ-synuclein and phosphorylated cystatin-S via one-pot iterative ligation and EPL-desulfurization methods. Besides, successful sextuple protection and deprotection of the expressed Interleukin-34 fragment demonstrate the great potential of this strategy in protein caging/uncaging investigations.

DOI: 10.1021/jacs.1c10324

Source:https://pubs.acs.org/doi/10.1021/jacs.1c10324