DAPI
| |||||||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||||||
| Ogólne informacje | |||||||||||||||||||||||
| Wzór sumaryczny |
C16H15N5 | ||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Masa molowa |
277,32 g/mol | ||||||||||||||||||||||
| Wygląd |
żółty proszek[1] | ||||||||||||||||||||||
| Identyfikacja | |||||||||||||||||||||||
| Numer CAS |
47165-04-8 | ||||||||||||||||||||||
| PubChem | |||||||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||||||
| Jeżeli nie podano inaczej, dane dotyczą stanu standardowego(25 °C, 1000 hPa) | |||||||||||||||||||||||
DAPI(4',6-diamidyno-2-fenyloindol) –organiczny związek chemiczny,aromatyczna,heterocyklicznaaminastosowana jakobarwnikfluorescencyjnysilnie wiążący się doDNA(dwuniciowego) na zasadzieinterkalacji[2][3].
Zastosowanie
[edytuj|edytuj kod]
Powszechnie używany do wybarwianiająder komórkowychlubchromosomów(poprzez wizualizację DNA) wmikroskopii fluorescencyjnej[4].Ponieważ DAPI przenika przez nienaruszonebłony biologiczne,może być używany do wybarwiania zarówno żywychkomórekjak i utrwalonych[5].
W mikroskopii fluorescencyjnej DAPI jest wzbudzany światłemultrafioletowym.Związany do DNA ma maksimumabsorpcjiprzypadające nadługość faliświetlnejrówną 358nm,a maksimumemisjiprzy 461 nm (kolor niebiesko-fioletowy). DAPI wiąże się także doRNA,aczkolwiek słabiej. Maksimum emisji DAPI związanego z RNA jest przesunięte do około 400 nm[6].
Niebieska emisja DAPI jest bardzo wygodna w obrazowaniu fluorescencyjnym przy użyciu kilku różnych barwników jednocześnie, ponieważ nie pokrywa się ona z emisją innych popularnychfluoroforów(na przykład zielonymGFPczyfluoresceiną).
Poza wybarwianiem jąder komórkowych, DAPI jest także używane do wykrywaniamykoplazm[7]lubwirusów(także na zasadzie wiązania ich DNA)[8]wkulturach komórkowych.
Ponieważ DAPI wiąże się bardzo ściśle z DNA na zasadzie interkalacji i tym samym zaburza jego strukturę, związek ten jest toksyczny imutagenny.Przy pracy z DAPI powinno się zachować szczególną ostrożność.
Przypisy
[edytuj|edytuj kod]- ↑DAPI (nr D9542)– karta charakterystyki produktu Sigma-Aldrich (Merck) na obszar Polski.
- ↑P. Chandra, B. Mildner, O. Dann, A. Metz.Influence of 4'-6'-diamidino-2-phenylindole on the secondary structure and template activities of DNA and polydeoxynucleotides.„Molecular and Cellular Biochemistry”. 18 (2-3), s. 81-86, 1978.DOI:10.1007/BF00280272.PMID:604784.
- ↑J. Kreuter, E. Liehl.Protection induced by inactivated influenza virus vaccines with polymethylmethacrylate adjuvants.„Medical Microbiology and Immunology”. 165 (2), s. 111-117, 1978.DOI:10.1007/BF02122746.PMID:672773.
- ↑M.S. Lin, O. S. Alfi, G. N. Donnell.Differential fluorescence of sister chromatids with 4'-6-diamidino-2-phenylindole.„Canadian Journal of Genetics and Cytology”. 18 (3), s. 545-547, 1977.DOI:10.1139/g76-068.PMID:63310.
- ↑H. M. Hull, R. W. Hoshaw, J. C. Wang.Cytofluorometric determination of nuclear DNA in living and preserved algae.„Stain Technology”. 57 (5), s. 273-282, 1983.DOI:10.3109/10520298209066723.PMID:6758206.
- ↑G. Manzini, L. Xodo, M. L. Barcellona, F. Quadrifoglio.Interaction of DAPI with double-stranded ribonucleic acids.„Nucleic Acids Research”.13 (24), s. 8955-8967, 1986.DOI:10.1093/nar/13.24.8955.PMID:4080554.PMCID:PMC318964.
- ↑M. Jagielski, M. Zaleska, S. Kaluzewski, I. Polna.Ocena przydatności DAPI do wykrywania mykoplazm w hodowlach komórkowych.„Medycyna Doświadczalna i Mikrobiologia”. 28 (2), s. 161-173, 1976.PMID:775226.
- ↑B. Mildner, P. Chandra.[Molecular mechanism of action of diamidinephenylindole (DAPI). II. Effect of DAPI on the template activity of DNA and polydeoxynucleotides in the DNA-polymerase system from bacteria, eukaryotic cells and RNA tumor viruses].„Cell Mol Biol Incl Cyto Enzymol”. 25 (6), s. 399-407, 1980.PMID:94275.(niem.).