检验人必会！白细胞计数“金标准”

白细胞手工计数法操作步骤

计数前准备           

1、白细胞稀释液：2%冰乙酸（冰乙酸2ml，蒸馏水98ml，10g/L亚甲蓝溶液3滴），混匀过滤后备用。稀释液的作用为消除红细胞的干扰，可不加亚甲蓝。

2、标本：用EDTA-K2抗凝全血或者用微量吸管采集末梢血。

3、计数工具：改良牛鲍计数板、盖玻片及显微镜

计数

1、稀释血液：在试管中加入0.38ml白细胞稀释液，用微量吸管准确吸取血样20μl，然后用棉花沿着吸管口方向擦净余血，同时检查血量是否足量。将吸管插入小试管中稀释液的底部，慢慢排出吸管内的血液，然后吸取上清液清洗吸管3次，立即混匀，制成白细胞悬液；

2、冲池：静置一段时间等红细胞完全破坏后，再次混匀。吸取10μl，沿盖玻片与计数板之间的缝隙冲入计数池。以计数池充满为准，如过多、过少或有气泡，则需要重新冲池；

3、计数：冲池后静置2-3分钟，待白细胞完全下沉后，用显微镜低倍镜计数四角4个大方格内的白细胞数，对压线的白细胞采用“记上不记下，数左不数右”的原则。

计算

公式解读：

N        4个大方格中白细胞的总数 

÷4      为每个大方格（即0.1μl）内白细胞平均数    

×10     1个大方格容积为0.1μl，换算为1.0μl

×20     血液稀释倍数 

×106    由1μl换算成1L

    白细胞计数的临床意义    

血常规中白细胞计数（WBC）及分类比例（DC）对于临床鉴别感染来说是最基本、最常用的指标，升高和降低的幅度也被检验医师和临床医师用作诊断疾病的手段。

血常规由于个体差异，影响指标的因素极多，且患者不同的疾病、甚至是不同的生理状态会引发血常规发生改变，其在感染方面诊断特异性差，容易出现误诊情况。

白细胞升高

①白细胞升高合并中性粒细胞比例升高，常提示急性细菌性感染，特别是革兰阳性球菌（如金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎链球菌等）感染。少数病毒感染，如流行性乙型脑炎和流行性出血热也可有上述表现。此外，血液与实体肿瘤、血管炎、成人Still病及肾上腺皮质激素的使用等多种非感染原因，也可引起白细胞及中性粒细胞升高。其生理性增高见于新生儿、月经期、妊娠、分娩及情绪变化等。

②白细胞总数升高合并淋巴细胞比例升高常提示急性病毒感染，如传染性单核细胞增多症，若长期持续升高，需注意与血液系统疾病，如白血病等进行鉴别。

 ③白细胞升高合并嗜酸粒细胞比例升高常提示寄生虫感染，也可见于结核、变态反应、肿瘤及药物等原因。

白细胞减少

①病毒、非典型病原体（如支原体、衣原体、立克次体等）及某些原虫（如疟原虫、黑热病原虫）感染可致白细胞减少。

②在细菌感染中白细胞减少常见于沙门菌感染、结核和布鲁菌病；白细胞正常或减少同时合并嗜酸粒细胞下降常提示沙门菌感染。应当注意的是，除上述情况外，某些细菌引起的严重感染（如脓毒症）时，白细胞总数也可显著减少，常提示病情危重。

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