基因敲除,怎么做最简单?
1个回答
通过同源重组使特定靶基因失活,以研究该基因的功能,称为基因敲除(gene knock-out)
基因敲除的技术路线如下:
(1)构建重组基因载体﹔
(2)用电穿孔等方法把重组DNA转入受体细胞内﹔
(3)用选择培养基筛选已击中的细胞﹔
(4)分子生物学检测。
据俺所知目前有RecA重组系统、Red重组系统
1、RecA重组系统由RecA和RecBCD组成,必须以环形的质粒状态存在。
2、Red同源重组系统由λ噬菌体exo、bet、gam三个基因组成,线性载体即可。目前用这种方法敲除大肠杆菌的已经非常成熟了。
也有很多人用基因沉默来研究细菌(例如antisense RNA)
基因敲除的技术路线如下:
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(2)用电穿孔等方法把重组DNA转入受体细胞内﹔
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据俺所知目前有RecA重组系统、Red重组系统
1、RecA重组系统由RecA和RecBCD组成,必须以环形的质粒状态存在。
2、Red同源重组系统由λ噬菌体exo、bet、gam三个基因组成,线性载体即可。目前用这种方法敲除大肠杆菌的已经非常成熟了。
也有很多人用基因沉默来研究细菌(例如antisense RNA)
相关问答
什么是基因敲除?
就是利用一段与靶基因序列相似或相同的外源DNA片段,使该片段与靶基因发生重组,把靶基因从染色体上替换下来,从而使靶基因失活。
基因敲减与基因敲除有什么区别
应该说基因敲除是基因干扰的个手段,主要指将目标基因沉默的现象,但是基因干扰主要是医学领域的名词。
基因删除是什么,和基因敲除有什么分别
基因敲除是通过同源重组将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位点,以达到定点修饰改造染色体上某一基因目的的一种技术。
基因敲除是怎样的?
基因敲除是基因打靶技术的一种,类似于基因的同源重组。指外源DNA与受体细胞基因组中序列相同或相近的基因发生同源重组,从而代替受体细胞基因组中的相同、相似的基因序列,整合入受体细胞的基因组中。此法可产...
全文什么是完全基因敲除和条件型基因敲除
完全基因敲除是指通过同源重组法完全消除细胞或者动物个体中的靶基因活性。 条件型基因敲除是指通过定位重组系统实现特定时间和空间的基因敲除。
基因敲除的意义是什么?
基因敲除(knockout)是指一种遗传工程基因修饰技术,针对某个感兴趣的遗传基因,通过一定的基因改造过程,令特定的基因功能丧失,并研究可能进一步对相关生命现象造成的影响,进而推测该基因的生物学功能。...
全文基因敲除和 转染 是一个意思吗
前一个的概念和步骤要大。两者都需要构建一个载体。转染的话 只要载体进入细胞,得到表达,就算成功了。而敲除则还需要一系列的基因重组,使目的序列被替换。 通过转染RNAi则可以在不敲除基因的前提下,使目的...
全文基因敲除和基因干扰有什么区别
应该说基因敲除是基因干扰的个手段,主要指将目标基因沉默的现象,但是基因干扰主要是医学领域的名词。
基因敲除和基因修饰的区别
基因敲除是指在基因组上把目的基因剔除使其不能正常工作,而基因修饰包括基因敲除、基因敲入、基因过表达。
基因敲除和基因干扰有什么区别?
基因敲除包括的面比较广,从DNA到RNA都有涉及,也就是说基因敲除包括DNA碱基对的替换和修饰,而基因干扰仅仅是在翻译水平上阻止RNA的翻译,降解特定的信使,对基因本身没有什么影响!
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